Сдача и приемка работ по 44-ФЗ: помощь адвоката
Данная статья будет интересна тем, кто осуществляет различную деятельность по государственным контрактам, например, доставка каких-либо товаров, строительство или ремонт какого-нибудь объекта.
Нормы 44-ФЗ «О контрактной системе в сфере закупок товаров, работ, услуг для обеспечения государственных и муниципальных нужд» направлены на регламентирование этих самых взаимоотношений между муниципалитетом, государством и юридическими лицами во избежание каких-либо разногласий в работе, а также для устранения коррупции в рядах государства.
Данный нормативный акт представляет собой некий план по осуществлению сделок или если прикажете алгоритм действий, которые необходимо осуществить чтобы заключить контракт. Здесь стоит отметить, что заключать контракт с организацией будут только в том случае, если история юридического лица предельно чиста (отсутствие в реестре недобросовестных) и организация не находится в стадии банкротства.
Отказ заказчика от приемки выполненных работ
У всего должно быть свое логичное завершение, ведь строительство не может идти вечно, а значит исполнение контракта дата конечная. Подрядчик выполнил работы в срок и финалом в его действиях будет принятие его фактически выполненной работы заказчиком. Вот тут обычно и происходят разногласия между заключившими контракт. Происходит это по самым различным причинам, либо подрядчик действительно отдалился от намеченного плана или совершил ряд существенных ошибок в работе, которые повлекли за собой некачественный труд, либо сам заказчик представлял в своей голове все иначе, ведь не всегда результат соответствует нашим ожиданиям. Не будем вдаваться в подробности кто прав, а кто виноват, а попробуем разобраться как же действовать в такой ситуации? Действия заказчика в таком случае будут следующими:
- Отказаться от подписания акта выполненных работ по договору
- Сделать фото нарушений в работе подрядчика. Под каждой фотографией запросить подпись подрядчика
- Написать письменную претензию в адрес подрядчика с предложением устранить недостатки или же вернуть денежные средства за уплаченные услуги по договору вследствие некачественно проведенной работы
- Найти экспертную организацию, которая могла бы провести экспертизу и подготовить заключение
- Уведомить подрядчика о дате и времени проведения осмотра экспертами и приглашение представителя подрядчика на осмотр
Подрядчик же в свою очередь имеет право оспорить данное заключение уже непосредственно в судебном порядке, подав ходатайство о проведении повторной независимой экспертизы и в случае если она покажет прямо противоположные выводы, судья обязана будет принять их во внимание, поскольку данная экспертиза является независимой и была проведена в рамках судебного процесса. Можем взять на себя все хлопоты и тендерное сопровождение в Екатеринбурге: профессионально от начала до исполнения контракта в полном объеме.
Уведомление заказчика об отказе от подписания акта выполненных работ по договору подряда (образец)
(наименование или Ф.И.О. подрядчика)
Куда: наименование подрядчика
Юридический адрес подрядчика:
От: наименование заказчика
Адрес заказчика:
Телефон заказчика:
Уведомление
об отказе от подписания акта
выполненных работ
«03» мая 2018 г. во время приемки выполненных по Договору подряда от «12»января 2018 г. N 569 работ были выявлены следующие отступления от условий Договора: перечислить существенные нарушения выявленные в процессе приемки работ
На основании вышеизложенного и руководствуясь п. 2 ст. 720 Гражданского кодекса Российской Федерации, заказчик заявляет об отказе от подписания Акта выполненных работ от «12″ января 2018 г. N 569.
С уважением,
Заказчик и подпись.
«03» мая 2018 г.
ПОЛЕЗНО: смотрите ВИДЕО по теме участия нашего адвоката в антимонопольном споре и подпишитесь на канал YouTube, чтобы иметь возможность получать совет адвоката через комментарии к ролику.
Как составить мотивированный отказ?
В тех случаях, когда подрядчик выполняет работу и вызывает заказчика принять ее, но заказчик уже заведомо уверен в том, что принятие работ не будет произведено поскольку подрядчик недобросовестно исполнял свою работу, необходимо писать мотивированный отказ в принятии результата деятельности вашего подрядчика. Что необходимо указать в вашем мотивированном отказе?
- Реквизиты подрядчика, кому вы направляете отказ;
- Как можно развернуто описать причины, по которым вы не принимаете работу подрядчика;
- Дату и подпись.
Далее пользуетесь обычной почтой или услугами курьера. Можно также доставить отказ лично, но не забудьте поставить печать организации и подпись принявшего сотрудника.
Что касается самого подрядчика, в вашем случае необходимо будет письменно уведомить заказчика о том, чтобы он не выполнял изменения в его работе пока не будет проведена независимая судебная экспертиза.
Сроки подписания акта выполненных работ
Порядок сдачи и приемки выполненных работ
После письменного уведомления подрядчиком второй стороны по договору о принятии работ, подрядчик должен подготовить акт приема передачи объекта, в котором перечислена вся проведенная подрядчиком работа, а заказчик в свою очередь обязан расписаться под каждым пунктом в случае, если все пункты договора исполнены надлежащим образом.
В противном случае необходимо указать, что конкретно не принимает заказчик, а подрядчик в свою очередь обязан в разумные сроки устранить несоответствия за свой счет и свои силы. Разумеется, должен он это сделать только если он считает, что работу действительно нужно исправлять и никак иначе. Нужно помнить, что заказчик может выявить скрытые дефекты уже после подписания акта приема передачи. Работы могут быть выполнены раньше прописанного в договоре срока, а также стоит отметить, что они также могут быть продлены по следующим обстоятельствам:
- подрядчик предоставляет доказательства того, что выполнение работы невозможно по каким-либо обстоятельствам, не зависящим от него;
- по обоюдному согласию составляется приложение к договору о продлении работы подрядчиком.
Довольно часто происходят такие моменты, когда подрядчик и заказчик не могут найти общий язык уже в процессе выполнения работ или по их окончании, в таком случае стороны прибегают к услугам наших адвокатов, которые разъясняют им их возможности на законодательном уровне и приводят их к какому-то общему и конструктивному решению, которое выгодно для обоих сторон.
Читайте также:
С нами исковое заявление о признании результатов торгов недействительными в срок
Автор статьи:© адвокат, управляющий партнер АБ «Кацайлиди и партнеры»
А.В. Кацайлиди
Статья 94. Особенности исполнения контракта / КонсультантПлюс
Путеводитель по контрактной системе. Вопросы применения ст. 94 |
— Привлечение к осуществлению закупки эксперта, экспертной организации
1. Исполнение контракта включает в себя следующий комплекс мер, реализуемых после заключения контракта и направленных на достижение целей осуществления закупки путем взаимодействия заказчика с поставщиком (подрядчиком, исполнителем) в соответствии с гражданским законодательством и настоящим Федеральным законом, в том числе:
КонсультантПлюс: примечание.
С 01.01.2022 в п. 1 ч. 1 ст. 94 вносятся изменения (ФЗ от 02.07.2021 N 360-ФЗ). См. будущуюредакцию.
1) приемку поставленного товара, выполненной работы (ее результатов), оказанной услуги, а также отдельных этапов поставки товара, выполнения работы, оказания услуги (далее — отдельный этап исполнения контракта), предусмотренных контрактом, включая проведение в соответствии с настоящим Федеральным законом экспертизы поставленного товара, результатов выполненной работы, оказанной услуги, а также отдельных этапов исполнения контракта;
КонсультантПлюс: примечание.
С 01.01.2022 в п. 2 ч. 1 ст. 94 вносятся изменения (ФЗ от 02.07.2021 N 360-ФЗ). См. будущуюредакцию.
2) оплату заказчиком поставленного товара, выполненной работы (ее результатов), оказанной услуги, а также отдельных этапов исполнения контракта;
КонсультантПлюс: примечание.
С 01.01.2022 в п. 3 ч. 1 ст. 94 вносятся изменения (ФЗ от 02.07.2021 N 360-ФЗ). См. будущуюредакцию.3) взаимодействие заказчика с поставщиком (подрядчиком, исполнителем) при изменении, расторжении контракта в соответствии со статьей 95 настоящего Федерального закона, применении мер ответственности и совершении иных действий в случае нарушения поставщиком (подрядчиком, исполнителем) или заказчиком условий контракта.
КонсультантПлюс: примечание.
С 01.01.2022 в ч. 2 ст. 94 вносятся изменения (ФЗ от 02.07.2021 N 360-ФЗ). См. будущуюредакцию.
2. Поставщик (подрядчик, исполнитель) в соответствии с условиями контракта обязан своевременно предоставлять достоверную информацию о ходе исполнения своих обязательств, в том числе о сложностях, возникающих при исполнении контракта, а также к установленному контрактом сроку обязан предоставить заказчику результаты поставки товара, выполнения работы или оказания услуги, предусмотренные контрактом, при этом заказчик обязан обеспечить приемку поставленного товара, выполненной работы или оказанной услуги в соответствии с настоящей статьей.
3. Для проверки предоставленных поставщиком (подрядчиком, исполнителем) результатов, предусмотренных контрактом, в части их соответствия условиям контракта заказчик обязан провести экспертизу. Экспертиза результатов, предусмотренных контрактом, может проводиться заказчиком своими силами или к ее проведению могут привлекаться эксперты, экспертные организации на основании контрактов, заключенных в соответствии с настоящим Федеральным законом.4. Утратил силу. — Федеральный закон от 01.05.2019 N 71-ФЗ.(см. текст в предыдущей редакции
)
4.1. Правительство Российской Федерации вправе определить случаи обязательного проведения экспертами, экспертными организациями экспертизы предусмотренных контрактом поставленных товаров, выполненных работ, оказанных услуг.
(часть 4.1 введена Федеральным законом от 04.06.2014 N 140-ФЗ; в ред. Федерального закона от 01. 05.2019 N 71-ФЗ)(см. текст в предыдущей редакции
)
5. Для проведения экспертизы поставленного товара, выполненной работы или оказанной услуги эксперты, экспертные организации имеют право запрашивать у заказчика и поставщика (подрядчика, исполнителя) дополнительные материалы, относящиеся к условиям исполнения контракта и отдельным этапам исполнения контракта. В случае, если по результатам такой экспертизы установлены нарушения требований контракта, не препятствующие приемке поставленного товара, выполненной работы или оказанной услуги, в заключении могут содержаться предложения об устранении данных нарушений, в том числе с указанием срока их устранения.
(в ред. Федерального закона от 27.12.2018 N 512-ФЗ)(см. текст в предыдущей редакции
)
6. По решению заказчика для приемки поставленного товара, выполненной работы или оказанной услуги, результатов отдельного этапа исполнения контракта может создаваться приемочная комиссия, которая состоит не менее чем из пяти человек.
КонсультантПлюс: примечание.
С 01.01.2022 в ч. 7 ст. 94 вносятся изменения (ФЗ от 02.07.2021 N 360-ФЗ). См. будущуюредакцию.
7. Приемка результатов отдельного этапа исполнения контракта, а также поставленного товара, выполненной работы или оказанной услуги осуществляется в порядке и в сроки, которые установлены контрактом, и оформляется документом о приемке, который подписывается заказчиком (в случае создания приемочной комиссии подписывается всеми членами приемочной комиссии и утверждается заказчиком), либо поставщику (подрядчику, исполнителю) в те же сроки заказчиком направляется в письменной форме мотивированный отказ от подписания такого документа. В случае привлечения заказчиком для проведения указанной экспертизы экспертов, экспертных организаций при принятии решения о приемке или об отказе в приемке результатов отдельного этапа исполнения контракта либо поставленного товара, выполненной работы или оказанной услуги приемочная комиссия должна учитывать отраженные в заключении по результатам указанной экспертизы предложения экспертов, экспертных организаций, привлеченных для ее проведения.
7.1. В случае установления заказчиком требования об обеспечении гарантийных обязательств оформление документа о приемке (за исключением отдельного этапа исполнения контракта) поставленного товара, выполненной работы (ее результатов), оказанной услуги осуществляется после предоставления поставщиком (подрядчиком, исполнителем) такого обеспечения в соответствии с настоящим Федеральным законом в порядке и в сроки, которые установлены контрактом.
(часть 7.1 введена Федеральным законом от 01.05.2019 N 71-ФЗ)КонсультантПлюс: примечание.
С 01.01.2022 ст. 94 дополняется ч. 7.2 (ФЗ от 02.07.2021 N 360-ФЗ). См. будущуюредакцию.
8. Заказчик вправе не отказывать в приемке результатов отдельного этапа исполнения контракта либо поставленного товара, выполненной работы или оказанной услуги в случае выявления несоответствия этих результатов либо этих товара, работы, услуги условиям контракта, если выявленное несоответствие не препятствует приемке этих результатов либо этих товара, работы, услуги и устранено поставщиком (подрядчиком, исполнителем).
9 — 12. Утратили силу. — Федеральный закон от 01.05.2019 N 71-ФЗ.(см. текст в предыдущей редакции
)
КонсультантПлюс: примечание.
С 01.01.2022 ст. 94 дополняется ч. 13 — 14 (ФЗ от 02.07.2021 N 360-ФЗ). См. будущуюредакцию.
КонсультантПлюс: примечание.
С 01.04.2022 ст. 94 дополняется ч. 15 (ФЗ 02.07.2021 N 360-ФЗ). См. будущуюредакцию.
Что такое приемочная комиссия по 44-ФЗ
После победы на электронных торгах поставщик выполняет обязательства, выполняя условия госконтракта. Заказчик вправе создать комиссию для приёмки выполненных работ, услуг или товаров. Данный комплекс мер регулирует ст. 94 44-ФЗ.
Для победы в госзакупке необходимо провести тщательную аналитику рынка. Сервис Астрал.Поставщик поможет найти выгодный контракт на электронных торгах, изучить информацию о заказчике и конкурентах. Оставьте заявку, и наши специалисты свяжутся с вами в короткий срок.
Какие функции и обязанности выполняет приёмочная комиссия по 44-ФЗ
Целью приёмочной комиссии является проверка выполненных работ или поставленных товаров на предмет соответствия установленным требованиям. Обоснованный отказ от приёма работ влияет на отстаивание интересов в спорах с поставщиком.
Права и обязанности приёмочной комиссии по 44-ФЗ следующие:
- осуществление приёма услуг или товаров в присутствии контрактной службы или управляющего компанией;
- при необходимости вызывать представителей поставщика;
- истребовать дополнительную документацию;
- получать разъяснения от представителей подрядчика;
- проводить экспертизы, делать заключения и вносить предложения самостоятельно или привлекая сторонних специалистов;
- принимать решения о соответствии выполненных услуг или поставленной продукции заявленным в контракте характеристикам;
- принимать результаты работ на конкретном или заключительном этапе;
- обеспечивать объективное заключение.
Как создать комиссию по 44-ФЗ
Решение о необходимости комиссии принимает заказчик. Порядок создания регулирует часть 6 ст. 94 44-ФЗ. Обязанности заказчика и участников прописывают в специальном приказе.
Документ содержит в себе:
- наименование заказчика;
- текст приказа;
- состав с указанием председателя, его заместителя и перечисление остальных членов комиссии;
- порядок работы;
- текст о необходимости доведения положений приказа до членов приёмной комиссии;
- отметки об ознакомлении.
Кто входит в состав комиссии по 44-ФЗ
Ч. 6 ст. 39 ФЗ-44 регламентирует минимальное количество участников приёмочной комиссии от пяти и более человек.
В состав входят незаинтересованные в результатах приёмки граждане. Имеющие профессиональную подготовку в той области, в которой происходит заявленная процедура.
Члены комиссии должны иметь соответствующие требования и навыки:
- образование;
- стаж работы по специальности;
- опыт проведения экспертизы;
- знания законодательства.
Председатель комиссии руководит заседаниями и несёт ответственность за оформление актов приёма-передачи.
К комиссии не допускаются лица, которые:
- занимаются организацией и проведением госзакупок;
- могут влиять на результаты приёмки;
- имеют полномочия по контролю в сфере госзаказов.
Если указанные лица были выявлены в составе комиссии, или её член не может исполнить свои обязанности, то происходит незамедлительное исключение или замена. Провести замену имеет право только заказчик закупки.
Регламент работы приёмочной комиссии по 44-ФЗ
Помимо приказа о создании приёмочной комиссии, заказчик определяет правила её работы. Создаётся специальный документ — регламент, где указывают срок работы, место проведения заседаний и порядок рассмотрения заявок.
В нём прописывают такие пункты, как:
- общие положения;
- задачи и функции;
- состав и полномочия;
- порядок и срок проведения приёмки;
- ответственность членов комиссии за результаты работы.
Каждое заседание приёмочной комиссии сопровождается письменным протоколом.
Перед оценкой проделанных работ необходимо определить:
- конкретные характеристики товаров или услуг — количество, ассортимент, комплектность, объём;
- физико-механические, химические, микробиологические и прочие показатели товаров, материалов и оборудования.
Как проходит экспертиза приёмки товара по 44-ФЗ
Для проверки предоставленных результатов услуг или товаров, заказчик проводит экспертизу. Её целью является установление соответствия нормативной документации, качества, требований технического регламента и ГОСТ.
Приёмочная комиссия проводит экспертизу самостоятельно или заключает контракт со сторонними специалистами. В контракте прописывают:
- полномочия;
- функции;
- права и обязанности;
- ответственность;
- объём и сроки выполнения экспертизы;
- утверждённые формы используемых документов.
Экспертиза по 44-ФЗ проводится в присутствии контрактного управляющего или ответственного лица. Таможенная или карантинная служба присутствует при проведении экспертизы определённых видов товаров или услуг, если того требует законодательство РФ.
Способ проведения определяется заказчиком. Результат выполненных обязательств проверяют тремя способами:
- сплошным методом — осуществляется проверка каждой единицы товара или полная проверка выполненных работ;
- выборочный способ — проверке подвергают произвольную часть продукции или выполненных работ, используя результат как общий в конечном заключении;
- оценка качества во время эксплуатации — принимается во внимание мнение конечных потребителей.
Комиссия или нанятые эксперты используют представленные подрядчиком накладные, счета-фактуры, сертификаты, акты и другие документы, связанные с исполнением госконтракта. При необходимости могут затребовать дополнительную документацию и разъяснения от подрядчика или его представителей.
Экспертиза проводится с помощью специальных средств измерений, подлежащих государст¬венному метрологическому контролю. Они должны быть откалиброваны любой метро¬логической службой или иной уполномоченной организацией.
Для подтверждения исследования на объект экспертизы наносят оттиск личного штампа эксперта. Данную операцию не проводят, если это приводит к потере товарного вида или к невозможности в дальнейшей эксплуатации товара или услуги. Члены комиссии составляют экспертное заключение, в котором указывают перечень поставляемых товаров или услуг и претензии, если таковые были выявлены. Если члены комиссии не приходят к единому мнению при заключении экспертизы, они составляют протокол разногласий. Заказчику предоставляется срок на исправления выявленных нарушений.
На основе полученных экспертных заключений и предложений комиссия выносит объективное решение относительно проделанной работы.
Составление акта экспертизы по 44-ФЗ
Результаты экспертных исследований вносят в отдельный акт экспертизы. Он содержит в себе описание фактов, установленных в ходе проверки. В нём не допускаются исправления и помарки.
Акт экспертизы состоит из трёх частей: вводная, исследовательская и вывод.
Вводная
Эта часть содержит в себе:
- сведения об экспертах, заказчике и его представителях;
- дату и место проведения экспертизы;
- дату и номер контракта госзакупки;
- ФИО, должности и сроки действия аттестатов экспертов;
- назначение и наименование объекта экспертизы;
- задачу проверки;
- сведения о поставщике и документации;
- условия хранения объектов экспертизы;
- целостность упаковки и маркировка.
Исследовательская
В этой части содержится:
- описание объекта экспертизы;
- порядок изучения предъявленных документов;
- методы и этапы проведения;
- сведения и условия применения измерительных средств;
- характеристика использованных устройств и материалов;
- сведения о нормативной и технической документации;
- фактические результаты проведения;
- оценка и анализ отдельных этапов экспертизы;
- дата начала и окончания экспертной проверки;
- причины невозможности решения отдельных вопросов.
Вывод
В нём указывают:
-
недвусмысленные ответы, исключающие двоякое толкование, которые не требуют дополнительных пояснений;
при необходимости, причины, по которым невозможно дать ответ в поставленной задаче;
выводы, установленные в процессе экспертного исследования.
Акт экспертизы подписывают специалисты, проводившие исследования. Его прилагают к протоколу приёмочной комиссии или включают результат экспертной проверки в акт приёмки выполненных работ.
Составление акта о результатах работы комиссии по 44-ФЗ
По результатам общей оценки составляется и подписывается членами приёмочной комиссии специальный акт. Форму и состав документа заказчик определяет самостоятельно. В нём указывают:
-
номер госконтракта;
наименование объектов приёмки;
соответствие результатов работ или товаров, заявленным требованиям;
стоимость выполненных работ;
заключение экспертной комиссии;
подписи участников приёмочной комиссии.
Его составляют в сроки, указанные в контракте. Поставщик получает образец акта с решением, подписанный заказчиком. Документация без подписи отправляется в случае, когда комиссия не приняла работы или услуги. В таком акте указывают причины отказа. После подписанного акта, ответственность за принятые товары или услуги переходят к заказчику.
Чтобы подписывать электронные документы и отправлять их контрагентам, понадобится усиленная квалифицированная электронная подпись. Такую подпись получают только в аккредитованном удостоверяющем центре. ГК «Астрал» имеет необходимые лицензии ФСБ РФ для выпуска продукции Астрал-ЭТ и 1С-ЭТП. ЭЦП можно использовать не только для отправки электронной документации, но и для сдачи отчётности в госорганы или для участия в электронных торгах.
Заключение
Приёмка результатов выполненных работ по 44-ФЗ является важным этапом участия в государственном контракте. В процедуре выявляют наличие или отсутствие претензий. Создание специальной комиссии и проведение экспертиз улучшает качество приёмки товаров или услуг. Обязанности коллегиального органа регламентируется внутренним приказом. Результатом работы приёмочной комиссии является составление акта выполненных работ в свободной форме.
Подготовка и успешный финал в госзакупках по 44-ФЗ требует специальных знаний и подготовки. «Астрал.Тендер» предлагает целый комплекс услуг для участия в закупках. Специалисты компании проведут обучение руководителей и сотрудников для самостоятельной работы или пройдут регистрацию и примут участие в электронных торгах за клиента.
Заказчик не подписывает акты и не принимает выполненные работы — что делать?
При работе с госзаказчиками, как правило, все идет достаточно четко и планомерно, если участник сам добросовестно выполняет свои обязательства по контракту. Но и здесь нельзя на сто процентов застраховаться от ситуаций, когда заказчик не подписывает акт приёмки или указывает, что услуга, товар или работы не соответствуют требованиям качества.
Если в отношениях закупок в рамках 223 Федерального закона эти вопросы можно урегулировать заранее, например, прописать в договоре штрафные санкции за немотивированную просрочку в приемке или даже установить, что работы считаются принятыми с момента сдачи документов уполномоченному представителю принимающей стороны. То в случае государственных закупок эта проблема чаще всего решается через суд.
Существенные условия госконтракта в рамках 44 Федерального закона поменять невозможно, поэтому в случае таких конфликтов вопросы решаются в претензионном порядке.
Претензионная работа с заказчиком
Для суда потребуются доказательства того, что исполнитель пытался сдать работы и обращался к заказчику. Участник должен направить заказное письмо с уведомлением о вручении, в котором содержится сообщение:
- о завершении работ;
- акты;
- назначено время приемки, в которое представитель заказчика должен явится.
На будущее, для суда должно быть видно, что заказчика приглашали, работы пытались сдать, но он необоснованно уклонялся от приемки и подписания актов выполненных работ. Поэтому важно правильно сдавать документы: должно быть видно, что они получены другой стороной.
Зачастую бывает, что поставщик приезжает в офис заказчика, оставляет документы где-то у секретаря и уезжает, не получив подтверждения о приемке. В такой ситуации, в суде будет очень легко доказать, что никаких документов предоставлено не было.
Лучше всего будет отправить документы почтой, с подтверждением о вручении. Так как такой факт заказчику будет очень сложно оспорить в суде и доказать, что поставщик не предоставил акты для подписания практически нереально.
Если заказчик не является на приемку ТРУ – акт подписывается в одностороннем порядке.
Такой документ служит основанием для оплаты и может быть признан судом недействительным только, если мотивы отказа от подписания обоснованы.
Здесь нужно подумать о доказательствах выполнения работ для суда:
- засвидетельствовать выполнение третьей независимой стороной;
- пригласить субподрядчиков;
- поставщиков материалов;
- подготовить промежуточные акты;
- переписку с заказчиком. Сейчас, заверенная нотариусом интернет-переписка также служит доказательством в суде.
А вот фотографии выполненных работ суды обычно не принимают, т.к. непонятно — где это снято, что за объект, в какой период сделано фото и так далее.
Бывает, что заказчик не принимает работы, т.к. его не устраивает качество. Нужно тогда смотреть, а было ли требование к качеству вообще детально прописано в аукционной документации и контракте?
Часто – это только общие фразы, например, товар должен быть пригоден для использования. Заказчик должен указать конкретные, а не общие замечания, почему он считает услугу или товар не пригодными, в чем выразился недостаток. При этом все требования, которые предъявляются к поставщику должны совпадать с условиями, описанными в документации.
После определения недостатков, стороны должны согласовать срок их устранения. Возможно, потребуется заключение эксперта, которое поможет доказать поставщику, что качество товара, работ или услуг соответствует условиям контракта.
Подготовка претензии заказчику
Известно, что решение любых вопросов нужно сопровождать письменными документами. Если что-то не удается урегулировать с заказчиком, не надо ждать, что оно само решится. В государственных закупках каждый день очень важен, потому что сроки строго регламентированы законом и их нарушение ведет к штрафам и пеням.
Нужно готовить претензию сразу, как только что-то пошло не так.
Этот документ можно разбить на несколько частей:
- В так называемой шапке, пишем кому и от кого, регистрируем исходящий номер.
- Далее необходимо кратко описать ситуацию. Например, “такого-то числа был заключен государственный контракт номер такой-то. Работы выполнены в полном объеме и приняты заказчиком 15 февраля, оплата должна была быть произведена 15 марта. Уже начался апрель, а оплаты до сих пор не поступило.”
- Также надо указать на пункты контракта, в которых зафиксированы сроки и ответственность, сделать ссылку на п. 5 ст. 34 44-ФЗ, согласно которой заказчик, допустивший просрочку, уплачивает в размере одной трехсотой действующей на дату уплаты пеней ставки рефинансирования Центрального банка Российской Федерации от не уплаченной в срок суммы.
- Указывается расчет, нормы закона на которые ссылается участник, срок ответа на претензию, как правило, это 7 дней и само требование.
Онлайн обучение работе с госзаказом — более 70 видеороликов и 30 шаблонов
Пройти курсСкидки!Пеня по контракту
В претензии нужно указать краткий расчет задолженности: 1/300 умножается на ставку рефинансирования (в апреле 2018 года текущая ставка 7,25%) полученное произведение умножается на сумму долга и на количество дней просрочки.
Размер штрафа зависит от цены контракта, например, если цена меньше трех миллионов, то штраф будет 2,5 % от стоимости контракта. Также за другие нарушения заказчика установлены штрафы в виде фиксированной суммы.
В простых стандартных случаях составить претензию под силу участнику самому. В сложных ситуациях лучше все-таки обратится к специалистам.
При возникновении проблем с заказчиком по контракту 44-ФЗ –отказа в подписании актов или задержки оплаты, мы советуем сразу же пытаться решить эту проблему. Сначала попробовать урегулировать все мирным путем переговоров, а если заказчик так и не выполнит свои обязательства, то решать проблему необходимо через суд. Т.к. если, например, акты не будут подписаны к сроку окончания исполнения контракта, это будет только проблемой поставщика. И штрафы за это будут наложены на исполнителя.
©ООО «РусТендер»
Материал является собственностью tender-rus. ru. Любое использование статьи без указания источника — tender-rus.ru запрещено в соответствии со статьей 1259 ГК РФ
Статьи по теме:
НДС в контракте
Закупка продуктов питания по 44-ФЗ
Закупки малого объема 44-ФЗ
Поделитесь ссылкой на эту статью
Как принять работы по контракту
Что предусмотреть при организации приемки
Приемка результата выполненных подрядчиком работ – важный этап исполнения контракта, которому следует уделить особое внимание. Результат выполненных подрядчиком работ может не соответствовать условиям контракта или иным требованиям. В этом случае возможность дальнейшей защиты имущественных интересов органа местного самоуправления как заказчика работ зависит от того, как прошла их приемка.
Законодательство и правоприменительная практика различают сдачу и приемку результата выполненных по контракту работ. Сдача результата выполненных по контракту работ – обязанность подрядчика (п. 2 ст. 763, п. 1 ст. 740, ст. 758, п. 1 ст. 702 Гражданского кодекса РФ). После выполнения работ подрядчик обязан известить заказчика об их завершении и предъявить результат к приемке.
Если заказчик не извещен о завершении работ по договору строительного подряда, подрядчик не может ссылаться на отказ заказчика от приемки и требовать оплаты на основании одностороннего акта сдачи (п. 8 информационного письма Президиума ВАС РФ от 24 января 2000 г. № 51).
Приемка результата работ – обязанность заказчика. Заказчик, получивший сообщение подрядчика о готовности к сдаче результата выполненных работ, обязан немедленно приступить к его приемке (п. 1 ст. 753 Гражданского кодекса РФ).
Обязательство по оплате возникает в связи с тем, что подрядчик сдал результат выполненных работ, а не в связи с фактом его приемки заказчиком (п. 8 информационного письма № 51). Но прежде чем оплачивать подрядчику выполненные им работы по контракту, заказчику следует эти работы принять. Организуйте и осуществите приемку результата работ за свой счет, если иное не предусмотрено договором (п. 2 ст. 753 Гражданского кодекса РФ). Вы как заказчик несете риски неисполнения обязанности по организации и приемке результата выполненных работ. Уклонение заказчика от принятия работ не освобождает его от их оплаты (постановление Президиума ВАС РФ от 3 декабря 2013 г. № 10147/13).
Порядок и сроки приемки результата работ и его оформления определяются контрактом (ч. 13 ст. 34 Федерального закона от 5 апреля 2013 г. № 44-ФЗ). Если приемке должны предшествовать предварительные испытания, она проводится при их положительном результате (п. 5 ст. 753 Гражданского кодекса РФ). Если результаты испытаний отрицательные, нужны повторные испытания. Если подрядчик по договору строительного подряда после получения отрицательных результатов предварительных испытаний не провел такие испытания повторно, заказчик вправе отказаться от подписания акта приемки работ (п. 7 информационного письма № 51).
Для проверки результата выполненных подрядчиком работ в части соответствия условиям контракта заказчик обязан провести экспертизу (ч. 3 ст. 94 Закона № 44-ФЗ). Сделайте это своими силами или привлеките сторонних экспертов либо экспертную организацию. Они отразят свои предложения в заключении. Для проведения экспертизы экспертные организации имеют право запрашивать у заказчика и подрядчика дополнительные материалы, относящиеся к условиям исполнения контракта и отдельным этапам исполнения контракта.
Вы можете создать приемочную комиссию. Она должна состоять не менее чем из пяти человек (ч. 6 ст. 94 Закона № 44-ФЗ). Если вы привлекли эксперта или экспертную организацию, комиссия должна учесть их заключение, когда будет принимать решение о приемке или отказе от приемки результата выполненных работ.
Как оформить приемку результата работ
Приемку результата выполненных по контракту работ оформите актом. Его подписывают обе стороны контракта (п. 4 ст. 753 Гражданского кодекса РФ, ч. 7 ст. 94 Закона № 44-ФЗ). Если создана приемочная комиссия, все ее члены должны подписать акт. Затем свою подпись ставит заказчик (уполномоченное им должностное лицо).
Если орган местного самоуправления не исполнил обязанность по приемке, подрядчик вправе предъявить требование об оплате результата выполненных работ на основании одностороннего акта. Суд признает односторонний акт сдачи результата работ недействительным, только если согласится с тем, что ваши мотивы отказа от подписания акта были обоснованными (п. 4 ст. 753 Гражданского кодекса РФ). При отказе заказчика по договору строительного подряда от оплаты работ, выполнение которых подтверждено односторонним актом, суд должен рассмотреть доводы заказчика (определение Верховного суда РФ от 17 августа 2015 г. по делу № 308-ЭС15-6751, А32-10902/2012, п. 14информационного письма Президиума ВАС РФ от 24 января 2000 г. № 51).
Информация об исполнении контракта, в том числе документ о приемке выполненной работы, включается в реестр контрактов. Заказчик в течение трех рабочих дней с даты приемки выполненной работы должен направить документ о приемке работ в Федеральное казначейство. Оно проверит документ и разместит его в ЕИС в течение трех рабочих дней с даты получения.
Результаты исполнения контракта отражайте в отчетах. Размещайте их в единой информационной системе. Составление отчета об исполнении контракта, результатах отдельного этапа исполнения и размещение его в ЕИС – обязанность заказчика (ч. 9 ст. 94 Закона № 44-ФЗ). Отчет представляется в случаях, когда заказчик оплатил выполненные работы и подписал документ о приемке (утвердил подписанный приемочной комиссией документ). Отчет составляется также при оплате обязательств и приемке результатов по отдельному этапу исполнения контракта.
Отчет содержит информацию:
- об исполнении контракта, результатах отдельного этапа исполнения контракта, осуществленной поставке товара, выполненных работах или оказанных услугах, в том числе об их соответствии плану-графику, о соблюдении промежуточных и окончательных сроков исполнения контракта;
- о ненадлежащем исполнении или неисполнении контракта;
- об изменении или расторжении контракта в ходе его исполнения.
Отчет составьте в форме электронного документа. Форму возьмите в постановлении Правительства РФ от 28 ноября 2013 г. № 1093. Заверьте отчет электронной подписью уполномоченного должностного лица заказчика и разместите в ЕИС.
Когда можно отказаться от приемки
В порядке и в сроки, установленные контрактом, заказчик должен либо подписать представленный подрядчиком документ о приемке, либо направить подрядчику письменный отказ (ч. 7 ст. 94 Закона № 44-ФЗ). Отказ должен быть мотивированным. Согласно пункту 6 статьи 753 Гражданского кодекса РФ вы можете отказаться от приемки, если одновременно выполняются три условия.
1. Вы обнаружили, что подрядчик выполнил работы с недостатками.
2. Эти недостатки исключают возможность использования результата работ для указанной в договоре цели.
3. Ни подрядчик, ни вы как заказчик не можете устранить данные недостатки.
Если недостатки существенны и неустранимы, вы можете отказаться от исполнения договора и потребовать возмещения причиненных убытков (п. 3 ст. 723 Гражданского кодекса РФ). Но не отказывайтесь от приемки, если недостатки не препятствуют использованию результата работ для предусмотренной договором цели или могут быть устранены. Верховный суд указал, что сам по себе факт наличия некоторых недостатков в выполненных работах не может являться безусловным основанием для отказа заказчика от приемки и оплаты работ. Более того, Президиум ВАС РФ считает, что именно заказчик должен доказывать обстоятельства, послужившие основанием для отказа от подписания акта приемки выполненных работ (постановление от 27 марта 2012 г. № 12888/11).
Что делать с недостатками работ
Если подрядчик выполнил работу с недостатками, вы можете потребовать, чтобы он:
- безвозмездно устранил недостатки в разумный срок;
- соразмерно уменьшил установленную за работу цену;
- возместил вам расходы на устранение недостатков, если право заказчика устранять их предусмотрено в договоре подряда.
Эти требования установлены в пункте 1 статьи 723 Гражданского кодекса РФ. Они альтернативные. При выявлении недостатков в результате выполненных работ вы можете использовать только одно из них. Если договором установлена обязанность подрядчика своевременно устранять выявленные недостатки, она не может лишить заказчика права потребовать также соразмерного уменьшения цены по договору (постановление Президиума ВАС РФ от 5 июня 2012 г. № 17325/11).
Если подрядчик не устранил недостатки в срок, который вы установили, можно отказаться от исполнения договора и потребовать возмещения причиненных убытков (п. 3 ст. 723 Гражданского кодекса РФ).
Реализовать право на одно из трех требований заказчик может только в случае, если он выполнил обязанности по приемке результата выполненных работ и отразил их недостатки в акте приемки. Также можно оговорить в акте возможность последующего предъявления требования об устранении недостатков. Заказчик, принявший работу без проверки, лишается права ссылаться на недостатки работ, которые могли быть установлены при их приемке (п. 2, 3 ст. 720 Гражданского кодекса РФ).
При приемке работ полно и подробно отразите выявленные недостатки в акте, если они устранимы и не являются основанием для отказа от приемки. Если недостатки неустранимы, укажите их в мотивированном отказе от подписания акта. Описать все обнаруженные недостатки можно и в дефектной ведомости. Ее можно оформить как приложение к мотивированному отказу от приемки результата работ или к акту приемки результата работ с недостатками.
НА ЗАМЕТКУ:
Акт без замечаний не исключает возможность судебного спора
Заказчик может заявить в суде возражения по качеству, объему и стоимости выполненных работ даже после того, как подписал без замечаний акт приемки работ по договору строительного подряда. Такой позиции придерживается Президиум ВАС (постановление от 9 марта 2011 г. № 13765/10, п. 12–13информационного письма от 24 января 2000 г. № 51).
Документы о приемке по 44-ФЗ
Завершающим этапом исполнения госконтракта является приемка его объекта, которая сопровождается подписанием соответствующего документа. Чтобы в дальнейшем свести к минимуму риск возникновения спора по выполненному контракту, для обеих сторон важно грамотно составить акт приемки. Хотя это является задачей заказчика, исполнителю также необходимо знать о тонкостях составления этого документа.
Процедура приемки
В закупках по 44-ФЗ приемка регулируется статьей 94, а также отдельными пунктами статьи 34 закона. Процедура приемки, ее сроки и документы, которыми она оформляется, прописываются в госконтракте. Поэтому стороны заранее осведомлены о правилах этого процесса.
В обязанности заказчика входит формирование комиссии, в которую должны входить не менее 5 человек, являющихся его сотрудниками. Предшествовать подписанию документа о приемке должно проведение экспертизы товаров (работ, услуг). Экспертиза проводится с целью выявления возможных недостатков объекта закупки, а также определения того, насколько он соответствует требованиям заказчика, прописанным в документации.
Экспертиза может проводиться как собственными силами заказчика (внутренняя экспертиза), так и с привлечением специализированных организаций и независимых экспертов (внешняя экспертиза). Если контракт заключается с единственным поставщиком, то привлечение внешних экспертов обязательно.
Регистрация в ЕРУЗ ЕИС
С 1 января 2020 года для участия в торгах по 44-ФЗ, 223-ФЗ и 615-ПП обязательна регистрация в реестре ЕРУЗ (Единый реестр участников закупок) на портале ЕИС (Единая информационная система) в сфере закупок zakupki.gov.ru.
Мы оказываем услугу по регистрации в ЕРУЗ в ЕИС:
Заказать регистрацию в ЕИС
Описывая объект закупки, заказчик указывает требования, которым он должен соответствовать. И если такого соответствия нет хотя бы по одному пункту, то он вправе не принять товар, работу или услугу. В этом случае документ о приемке подписан не будет. При этом происходит возврат объекта закупки на доработку, если недостатки были несущественными и их можно исправить. В противном случае происходит расторжение контракта.
Если комиссия установила, что объект закупки полностью соответствует требованиям, то товар, работа или услуга принимается.
Оформление акта приемки
Законодательство гласит, что для подтверждения факта исполнения сторонами своих обязательств по госконтракту должны быть оформлены следующие документы:
- экспертное заключение;
- счет-фактура, акт выполненных работ;
- документ об оплате, например, платежное поручение.
Факт принятия заказчиком товара подтверждается актом приемки. Этот документ составляется произвольно, поскольку законодательством не определено его конкретной формы. В отдельных областях экономики существуют рекомендации профильных ведомств по составлению форм документов, в том числе акты приемки. Например, подобный регламент есть в строительстве.
Несмотря на отсутствие утвержденной формы, в акте должна содержаться следующая информация:
- перечень объектов закупки и их стоимость;
- результаты проведенной экспертизы;
- заключение комиссии по приемке, сделанное на основе результатов экспертизы, с перечислением всех найденных недостатков;
- подпись уполномоченного члена приемочной комиссии;
- подпись исполнителя.
Если исполнитель откажется подписывать документ, у заказчика есть право провести приемку в одностороннем порядке.
Если приемочная комиссия выявила нарушения, которые не позволяют принять объект закупки, стороны оформляют акт расхождений или акт разногласий. В этом документе необходимо перечислить все несоответствия поставленных товаров, выполненных работ или оказанных услуг требованиям закупочной документации, дефекты и прочие нарушения, допущенные поставщиком.
Образец акта приемочной комиссии по 44-ФЗ в 2021 году
Как принять продукцию, работы и услуги
Порядок приемки товаров, работ или услуг (ТРУ) стороны устанавливают в тексте контракта. В нем необходимо предусмотреть:
- срок, в течение которого исполнение производится и предоставляется заказчику;
- место проверки госзаказчиком исполнения: если речь идет о работах или услугах, место совпадает с местом выполнения или оказания соответственно, в случае поставки товара необходимо предусмотреть, куда товар доставят;
- срок проверки, в течение которого заказчик оценит представленный результат и вынесет свое суждение о соответствии или несоответствии условиям контракта;
- документ, которым оценка завершится. Как правило, это акт сдачи-приемки результатов оказания услуг, выполнения работ или поставки товара;
- действия заказчика, если результат, представленный контрагентом, его не удовлетворил, например, написание мотивированного отказа от подписания акта и прием поставленного товара на хранение, пока поставщик его не заберет;
- последствия направления заказчиком какого-либо ответа: если заказчик не принимает исполнение, но и не направляет мотивированный отказ в установленный срок, результат исполнения принимается автоматически — такое правило стороны обычно прописывают в соглашении.
Форма документа о приемке ТРУ бывает:
- произвольной — он составляется так, как стороны сочтут правильным;
- утвержденной контрактом — у заказчиков существует практика утверждения в качестве приложения к контракту формы акта сдачи-приемки результатов выполнения обязательств;
- унифицированная — иногда необходимо применять формы приемо-сдаточных документов, утвержденных нормативно, например, при проведении строительных работ или реконструкции подписывается акт формы КС-2.
Как сформировать приемочную группу
Статья 94 Федерального закона № 44-ФЗ устанавливает обязательность приемки поставленных товаров, работ или услуг. Часть 6 ст. 94 дает заказчикам возможность организовывать комиссионную приемку, численность группы — не менее пяти человек. Из формулировки закона следует, что создание приемочной группы — право, а не обязанность заказчика. Он вправе принимать ТРУ и без группы — ответственным должностным лицом единолично.
Если заказчик принимает решение о формировании комиссии, ему необходимо:
- Подобрать из числа сотрудников лиц, которые в нее войдут. Требования к таким лицам не устанавливаются, допускаются любые работники организации. Целесообразно включать в состав профильных специалистов, способных профессионально оценить предоставляемый результат контракта, сотрудников контрактной или юридической службы, которые проконтролируют правильность оформления документов по приемке и комплектность документов, предоставленных контрагентом.
- Издать приказ о формировании группы.
- Ознакомить всех членов группы с приказом и организовать непосредственную приемку результатов исполнения.
Госзаказчик вправе формировать отдельные группы для каждого контракта. Несколько — для разных групп контактов по разным направлениям деятельности. Или единую, которая принимает исполнение всех контрактов заказчика.
Основание для работы группы — положение о ее деятельности, которое принимается заранее, либо, если его не было, утверждается приказом о создании самой группы.
Как оформить документ о приемке
Он составляется в двух экземплярах — по одному для каждой из сторон контракта — и подписывается уполномоченными представителями каждой из сторон. Если со стороны заказчика действует группа сотрудников, каждый ее член расписывается в документе.
Документ содержит следующую информацию:
- дату и место составления;
- наименования сторон контракта;
- реквизиты контракта и его предмет;
- данные о состоявшемся исполнении: какие ТРУ были поставлены, количество, комплектность и прочие признаки, характеризующие исполнение;
- оценку госзаказчиком результата исполнения: надлежащее или ненадлежащее, есть ли претензии к исполнению, если есть, то какие;
- стоимость поставленных ТРУ.
Вот так выглядит образец акта приемки товара приемочной комиссии по 44-ФЗ:
А вот образец акта комиссионной приемки выполненных работ:
Образец акта приемки оказанных услуг по 44 ФЗ выглядит так:
Образец протокола приемочной комиссии 44-ФЗ:
Об авторе статьи
Гольцова Полина
юрист, специалист по госзакупкам
В 2011 году окончила УрГЮА (ИПиП), в 2013 — РАНХиГС по программе «Управление государственными и муниципальными закупками». С 2013 по 2018 года занималась юридическим сопровождением закупок бюджетных учреждений федерального и регионального уровней.
Другие статьи автора на gosuchetnik. ruАтрибуты документа | Название документа | |
ПРАВОВАЯ И ОРГАНИЗАЦИОННАЯ ОСНОВА ФЕДЕРАЛЬНОЙ И МУНИЦИПАЛЬНОЙ СИСТЕМЫ ЗАКУПОК | ||
Федеральный закон от 29.07.2012 г.51-ФЗ от 30 ноября 2014 г. | Гражданский кодекс Российской Федерации (часть I) | |
Федеральный закон от 26 января 1996 г. № 14-ФЗ | Гражданский кодекс Российской Федерации (часть вторая) | |
Федеральный закон от 31.07.1998 № 145-ФЗ | Бюджетный кодекс РФ | |
Федеральный закон от 29. 07.2012 г.195-ФЗ от 30 декабря 2001 г. | Кодекс Российской Федерации об административных правонарушениях | |
Федеральный закон от 5 апреля 2013 г. № 44-ФЗ (англ.) | О контрактной системе федеральных и муниципальных закупок товаров, работ, услуг | |
Федеральный закон от 26 июля 2006 г. N 135-ФЗ (в ред. 2016 г., англ.) | О защите конкуренции | |
Федеральный закон от 04.04.2011 № 99-ФЗ | О лицензировании отдельных видов деятельности | |
Федеральный закон от 13 декабря 1994 г. № 60-ФЗ | При поставке продукции для государственных нужд | |
Федеральный закон от 29.07.2012 г.53-ФЗ от 2 декабря 1994 г. | О закупке и поставке сельскохозяйственных товаров, сырья и продуктов питания для государственных нужд | |
Закон Российской Федерации № 5485-1 от 21 июля 1993 г. | По государственным секретам | |
Утверждено Председателем Правительства Российской Федерации Д.А. Медведева 30 июня 2014 г. | План мероприятий по внедрению системы договоров закупки на 2014 год | |
Приказ Минэкономразвития РФ №205 от 4 апреля 2014 г. | Об утверждении Плана мероприятий по внедрению системы закупок товаров, работ, услуг для государственных нужд на 2014 год | |
Приказ Минэкономразвития РФ от 29.10.2013 № 631 | Об утверждении формы договора оказания услуг | |
УПОЛНОМОЧЕННЫЕ ФЕДЕРАЛЬНЫЕ ИСПОЛНИТЕЛЬНЫЕ ОРГАНЫ В СФЕРЕ ЗАКУПОК | ||
Постановление Правительства РФ №964 от 11 сентября 2015 г. | О федеральном органе исполнительной власти, уполномоченном определять начальную (максимальную) цену контракта, а также цену контракта, заключаемого с единственным поставщиком (подрядчиком) при проведении государственных закупок в сфере градостроительной деятельности (кроме территориального планирования) | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 30 сентября 2014 г. № 996 | О разграничении полномочий между Минэкономразвития и Федеральным казначейством в рамках развития глобальной информационной системы закупок | |
Постановление Правительства РФ №1092 от 28 ноября 2013 г. | О порядке реализации полномочий Федеральной службой по налогово-бюджетному надзору (Росфиннадзор) по контролю в финансово-бюджетной сфере | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 26 августа 2013 г. № 728 | Об определении полномочий уполномоченных федеральных органов исполнительной власти в сфере федеральных и муниципальных закупок и о внесении изменений в отдельные постановления Правительства | |
Приказ Минфина Российской Федерации от 29.07.2012 г.18н от 14 марта 2014 г. | Об утверждении Руководящих указаний по осуществлению функции государственного контроля в финансово-бюджетной сфере Федеральной службой по налогово-бюджетному надзору (Росфиннадзор) | |
Приказ Федеральной антимонопольной службы Российской Федерации № 75/14 от 11 февраля 2014 г. | Об осуществлении Федеральной антимонопольной службой и ее территориальными подразделениями контроля за закупками на федеральном и муниципальном уровнях в соответствии с Федеральным законом от 25.07.2012 г.44-ФЗ «О контрактной системе федеральных и муниципальных закупок товаров, работ и услуг» | |
ПЛАНИРОВАНИЕ ЗАКУПОК, ОПРЕДЕЛЕНИЕ НАЧАЛЬНОЙ (МАКСИМАЛЬНОЙ) ЦЕНЫ ДОГОВОРА | ||
Постановление Правительства Российской Федерации № 555 от 5 июля 2015 г. | Об определении порядка обоснования закупок товаров, работ, услуг для федеральных и муниципальных нужд и форм такого обоснования | |
Постановление Правительства РФ №554 от 5 июля 2015 г. | О требованиях к формированию, утверждению и ведению плана-графика закупок товаров, работ, услуг для нужд регионов Российской Федерации и муниципальных нужд, а также о требованиях к формату плана-графика закупок товары, работы, услуги | |
Постановление Правительства Российской Федерации № 553 от 5 июля 2015 г. | Об утверждении Правил формирования, утверждения и ведения плана-графика закупок товаров, работ и услуг для федеральных нужд, а также требований к формату плана-графика закупок товаров, работ и услуг для государственных нужд. федеральные нужды | |
Постановление Правительства РФ №552 от 5 июля 2015 г. | Об утверждении Правил формирования, утверждения и ведения плана закупок товаров, работ, услуг для федеральных нужд, а также требований к формату плана закупок товаров, работ, услуг для федеральных нужд | |
Приказ Минэкономразвития России № 182/7 от 31 марта 2015 г. | Об особенностях публикации планов-графиков размещения заказов на 2015-2016 годы в единой информационной системе или до начала ее эксплуатации на официальном сайте Российской Федерации в информационно-телекоммуникационной сети Интернет для размещения информации о размещении заказов на поставку товаров, выполнения работ и оказания услуг | |
Постановление Правительства РФ №1044 от 21 ноября 2013 г. | О требованиях к разработке, утверждению и ведению графиков федеральных и муниципальных закупок товаров, работ и услуг и о требованиях к формату графика | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 21 ноября 2013 г. № 1043 | О требованиях к разработке, утверждению и ведению планов федеральных и муниципальных закупок товаров, работ и услуг и о требованиях к форме плана | |
Приказ Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии (Росстандарт) №14-ст от 31 января 2014 г. | Об утверждении и внедрении Общероссийского перечня видов экономической деятельности (ОКВЭД2) ОК 029-2014 (КДЕС ред.2) и Общероссийского перечня продукции по видам деятельности (ОКПД2) ОК 034-2014 (КПЭС 2008) | |
Приказ Минэкономразвития России № 578 от 10 октября 2013 г. | Об утверждении порядка проведения обязательных общественных обсуждений закупок товаров, работ, услуг для федеральных и муниципальных нужд в случае, если начальная (максимальная) цена контракта или цена единого контракта превышает 1 млрд руб. | |
Приказ Минэкономразвития России.№ 567 от 2 октября 2013 г. | Об утверждении Методических указаний по определению начальной (максимальной) цены контракта и цены единого контракта | |
Совместным приказом Минэкономразвития и Федерального казначейства № 544 / 18н от 20 сентября 2013 г. | Об особенностях размещения графиков закупок товаров, работ и услуг на 2014-2015 годы на официальном сайте для размещения информации о федеральных и муниципальных потребностях в поставке товаров, выполнении работ и услуг | |
Приказ Минэкономразвития России и Федерального казначейства №761 / 20н от 27 декабря 2011 г. | Об утверждении порядка публикации на официальном сайте графиков закупки товаров, работ и услуг для нужд клиентов, а также об утверждении формата графиков размещения заказов на поставку товаров, выполнение работ и услуг | |
ГЛОБАЛЬНАЯ ИНФОРМАЦИОННАЯ СИСТЕМА ЗАКУПОК, ПУБЛИКАЦИЯ НЕОБХОДИМОЙ ИНФОРМАЦИИ НА ОФИЦИАЛЬНОМ ВЕБ-САЙТЕ | ||
Федеральный закон от 29. 07.2012 г.63-ФЗ от 6 апреля 2011 г. | С электронной подписью | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 23 января 2015 г. № 36 | О порядке и сроках внедрения глобальной информационной системы закупок | |
Постановление Правительства РФ №1091 от 28 ноября 2013 г. | О единых требованиях к региональным и муниципальным информационным системам в сфере федеральных и муниципальных закупок товаров, работ и услуг | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 12 октября 2013 г. № 913 | Об утверждении Положения о размещении на сайте официальной системы закупок информации о закупках товаров, работ, услуг для федеральных и муниципальных нужд до официального запуска сайта | |
Приказ Минфина Российской Федерации и Федерального казначейства от 25. 07.2012 г.4н от 25 марта 2014 г. | Об утверждении Порядка регистрации государственных заказчиков и иных лиц (кроме поставщиков и подрядчиков), деятельность которых регулируется Федеральным законом № 44-ФЗ «О контрактной системе федеральных и муниципальных закупок товаров, работ и услуг». от 5 апреля 2013 г. на официальном сайте закупок Российской Федерации (www.zakupki.gov.ru) | |
ОГРАНИЧЕНИЯ НА ПОКУПКИ ТОВАРОВ, РАБОТ И УСЛУГ ИНОСТРАННОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ (ПО СООТВЕТСТВУЮЩИМ ЗАКОН №44-ФЗ) | ||
Постановление Правительства РФ. От 5 февраля 2015 г. № 102 | Об установлении ограничений на закупку отдельных видов медицинских изделий иностранного производства для федеральных и муниципальных нужд | |
Постановление Правительства РФ № 791 от 11 августа 2014 г. | Об установлении запрета на закупку товаров народного потребления иностранного производства для федеральных нужд | |
Постановление Правительства РФ №656 от 14 июля 2014 г. | Об установлении запрета на закупку отдельных видов продукции машиностроения иностранного производства для федеральных и муниципальных нужд | |
Приказ Минпромторга России № 1776 от 10 сентября 2014 г. | Об утверждении Правил выдачи постановлений об отсутствии на территории Российской Федерации производства товаров, перечисленных в приложении к Постановлению Правительства Российской Федерации от 27.07.2012 г.791 «Об установлении запрета на закупку товаров народного потребления иностранного производства для федеральных нужд» от 11 августа 2014 г. | |
Приказ Торгово-промышленной палаты Российской Федерации от 25 августа 2014 г. № 66 (приложение) | Порядок оформления экспертных заключений о стране происхождения по отдельным видам товаров в соответствии с Постановлением Правительства Российской Федерации от 29.07.2012 г.656 «Об установлении запрета на закупку отдельных видов продукции машиностроения иностранного производства для федеральных и муниципальных нужд» от 14 июля 2014 г. | |
Приказ Торгово-промышленной палаты Российской Федерации от 25 августа 2014 г. № 64 (Приложение 2) | Порядок выдачи экспертных заключений для нужд федеральных и муниципальных закупок | |
Приказ Торгово-промышленной палаты РФ №64 от 25 августа 2014 г. (Приложение 1) | Порядок выдачи сертификатов страны происхождения (форма СТ-1) для нужд федеральной и муниципальной закупки | |
Приказ Минэкономразвития России № 155 от 5 марта 2014 г. | Об условиях разрешения на закупку продукции иностранного производства для федеральных и муниципальных нужд | |
РАСЧЕТ БЮДЖЕТА (СТОИМОСТИ) В СФЕРЕ ЗАКУПОК (СТАТЬЯ 19 ФЕДЕРАЛЬНОГО ЗАКОНА №44-ФЗ) | ||
Постановление Правительства Российской Федерации от 2 сентября 2015 г. № 927 | Об определении требований к отдельным видам товаров, работ, услуг, закупаемых федеральными органами государственной власти, органами управления государственных внебюджетных фондов Российской Федерации, их территориальными органами и подведомственными им государственными и бюджетными учреждениями (в том числе предельные цены на товары, работы, услуги) | |
Постановление Правительства РФ №926 от 2 сентября 2015 г. | Об утверждении Общих правил определения требований к отдельным видам товаров, работ, услуг, приобретаемых покупателями (в том числе предельных цен на товары, работы, услуги) | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 20 октября 2014 г. № 1084 | О порядке определения бюджетов, необходимых для обеспечения деятельности федеральных органов государственной власти, органов управления внебюджетными фондами Российской Федерации и подведомственных им государственных структур. | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 13 октября 2014 г. № 1047 | Об общих требованиях к определению бюджетов, необходимых для обеспечения деятельности федеральных органов государственной власти, органов управления внебюджетными фондами и муниципальных образований | |
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ОБЪЕКТА ДОГОВОРА (СТАТЬЯ 33 ФЕДЕРАЛЬНОГО ЗАКОНА № 44 -FZ) | ||
Федеральный закон от 29.07.2012 г.184-ФЗ от 27 декабря 2002 г. | О техническом регулировании | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 28 ноября 2013 г. № 1086 | Об утверждении Правил разработки списков закупаемых лекарственных средств по их коммерческим (торговым) наименованиям и о внесении изменений в Положение о Государственной комиссии по охране здоровья | |
Постановление Правительства РФ №929 от 17 октября 2013 г. | Об установлении порога начальной (максимальной) контрактной цены (цены лота), выше которой лекарственные средства с другим международным непатентованным наименованием или при его отсутствии с химическими, групповыми наименованиями не могут быть предметом одного и того же договора ( много). | |
ЭНЕРГОЭФФЕКТИВНОСТЬ ПРИ ЗАКУПКАХ | ||
Федеральный закон от 29.07.2012 г.261-ФЗ от 23 ноября 2009 г. | Об энергосбережении и повышении энергоэффективности, а также об изменении отдельных законодательных актов Российской Федерации | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 18 августа 2010 г. № 636 | О требованиях к условиям энергосервисных договоров и об особенностях определения начальной (максимальной) цены / цены лота энергосервисных договоров | |
Постановление Правительства РФ №1221 от 31 декабря 2009 г. | Об утверждении Правил установления требований энергоэффективности при закупках товаров, работ, услуг для федеральных и муниципальных нужд | |
ДОПОЛНИТЕЛЬНЫЕ ТРЕБОВАНИЯ К УЧАСТНИКАМ ПРОЦЕССА ЗАКУПОК (ПОСТАВЩИКАМ, ПОДРЯДЧИКАМ) (ЧАСТЬ 2, СТАТЬЯ 31 ФЕДЕРАЛЬНОГО ЗАКОНА № 44-ФЗ) | ||
Постановление Правительства РФ №99 от 4 февраля 2015 г. | Об установлении дополнительных требований к участникам закупок отдельных видов товаров, работ и услуг, а также об определении случаев, когда такие товары, работы и услуги в силу их технической и (или) технологической сложности, инновационной, высокотехнологичной или специального назначения могут быть предоставлены только поставщиками (подрядчиками) с определенным уровнем квалификации / квалификации, и при утверждении документов, подтверждающих соответствие поставщиков таким дополнительным требованиям ЧАСТЬ 1.1., СТАТЬИ 31 И 104 ФЕДЕРАЛЬНОГО ЗАКОНА № 44-ФЗ) | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 25 ноября 2013 г. № 1062 | О порядке ведения реестра недобросовестных и недобросовестных поставщиков (подрядчиков) | |
ПРЕДПОЧТЕНИЯ ЗАКУПКИ (СТАТЬИ 27-30 ФЕДЕРАЛЬНОГО ЗАКОНА № 44-ФЗ) | ||
Федеральный закон от 29.07.2012 г.209-ФЗ от 24 июля 2007 г. | О развитии малого и среднего предпринимательства в Российской Федерации | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 17 марта 2015 г. № 238 | О порядке подготовки отчетов об объемах закупок у субъектов малого бизнеса и социально-ориентированных некоммерческих организаций, публикации потребности в таких закупках в глобальной системе закупок, а также о внесении изменений в Положение о Межведомственной комиссии по отбору инвестиционных проектов, российских кредитных агентств и международной финансовой организации для участия в Программе поддержки инвестиционных проектов, реализуемых на территории Российской Федерации с использованием проектного финансирования | |
Постановление Правительства РФ №649 от 14 июля 2014 г. | О порядке предоставления льгот по предложенной цене контракта субъектам государственной дисциплинарной системы | |
Постановление Правительства РФ № 341 от 15 апреля 2014 г. | О порядке предоставления льгот по предложенной цене контракта лицам, принимающим на работу инвалидов | |
ТЕНДЕРЫ И АУКЦИОНЫ (ПУНКТ 2 ГЛАВЫ 3 ФЕДЕРАЛЬНОГО ЗАКОНА №44-ФЗ) | ||
Постановление Правительства Российской Федерации от 28 ноября 2013 г. № 1088 | Об утверждении Правил проведения совместных конкурсов и аукционов | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 28 ноября 2013 г. № 1085 | Об утверждении Правил оценки заявок и окончательных предложений участников закупки товаров, работ, услуг для федеральных и муниципальных нужд | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 25 декабря 2005 г.2019-р от 31 октября 2013 г. | Перечень товаров, работ и услуг, закупка которых осуществляется клиентами через электронные аукционы | |
Приказ Минэкономразвития РФ от 31 марта 2015 г. № 189 | Об утверждении Порядка утверждения применения закрытых процедур выбора поставщиков и процедуры согласования единственного контракта | |
ЗАПРОС ЦЕНЫ (ПУНКТ 3 ГЛАВЫ 3 ФЕДЕРАЛЬНОГО ЗАКОНА №44-ФЗ) | ||
Постановление Правительства Российской Федерации от 30 сентября 2013 г. № 1765-р | Перечень товаров, работ и услуг, необходимых для оказания гуманитарной помощи при ликвидации последствий стихийных бедствий и техногенных катастроф | |
ОДИН ИСТОЧНИК (СТАТЬЯ 93 ФЕДЕРАЛЬНОГО ЗАКОНА № 44-ФЗ) | ||
Приказ Федеральной службы государственной статистики №352 от 3 августа 2015 г. | Об утверждении Порядка размещения на официальном сайте Росстата и сайтах территориальных органов Росстата в информационно-телекоммуникационной сети Интернет информации о договорах заключен с физическими лицами на работы, связанные со сбором и обработкой первичных статистических данных в процессе осуществления федерального статистического надзора на территории Российской Федерации в соответствии с законодательством Российской Федерации об официальном статистическом учете | |
Федеральный Закон.От 17 августа 1995 г. № 147-ФЗ | О естественных монополиях | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 30 декабря 2014 г. № 2785-р | О закупках военной формы и предметы личного пользования для федеральных нужд | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 26 декабря 2013 г. № 1292 | Об утверждении перечня товаров, работ и услуг, производимых (выполняемых) субъекты государственной дисциплинарной системы, закупка которых может осуществляться клиентами из одних рук | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 29.07.2012 г.826 от 19 сентября 2013 г. | Об утверждении Порядка ведения реестра единственных поставщиков вооружения и военной техники | |
Приказ Минэкономразвития России № 189 от 31 марта 2015 г. | Об утверждении Порядка утверждения применения закрытых процедур выбора поставщиков и процедуры утверждения договоров из одного источника | |
ГАРАНТИИ ПРЕДЛОЖЕНИЙ И КОНТРАКТОВ (СТАТЬИ 44, 45, 96 ГАРАНТИИ ФЕДЕРАЛЬНЫЙ ЗАКОН №44-ФЗ) | ||
Постановление Правительства Российской Федерации от 6 марта 2015 г. № 199 | О случаях и условиях, при которых в 2015 году клиенты могут не требовать договорных гарантий в сообщении о намерении закупки и (или) в проектах договоров | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 28 октября 2014 г. № 1107 | О требованиях к финансовой устойчивости банков, в которых электронные операторы платформы открывают счета для контроля за денежными средствами, перечисляемыми участниками закупки для обеспечения их заявок, на порядок ведения банковского реестра, а также на требования к банковским договорам, заключаемым между оператором электронной платформы и банками в целях контроля за переводом средств участниками закупки в качестве гарантии торгов | |
Resoluti Постановления Правительства РФ №№ 1005 от 8 ноября 2013 г. | О банковских гарантиях, используемых в целях Федерального закона «О контрактной системе федеральных и муниципальных закупок товаров, работ, услуг» | |
Приказ Минфина Финансы Российской Федерации от 18 декабря 2013 г. № 126н | О порядке сбора информации и документов для ведения реестра банковских гарантий | |
ДОГОВОРЫ (СТАТЬИ 34, 94, 95, 103 ФЕДЕРАЛЬНОГО ЗАКОНА №44-ФЗ) | ||
Приказ Минфина РФ от 29.01.2015 № 98н | О порядке списания клиентами начисленных сумм пеней (пеней, пеней) в 2015 году | |
Постановление Правительства Российской Федерации № 199 от 6 марта 2015 г. | О случаях и условиях, при которых в 2015 году клиенты могут не требовать гарантий по договору в уведомлении о намерении покупки и (или) в проектах контрактов | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 28.07.2012 г.№ 198 от 6 марта 2015 г. | Об утверждении Правил внесения изменений в договор, внесенных по взаимному соглашению сторон, таких как изменение срока поставки, цены договора, цены позиции товаров, работ и услуг, количества товаров и объема работы или услуги, по договорам, срок действия которых истекает в 2015 г. | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 5 марта 2015 г. № 196 | О случаях и порядке предоставления клиентами продления сроков уплаты штрафов и сборов, и (или) освобождение от начисленных пеней и сборов в 2015 г.963 от 20 сентября 2014 г. | О банковских услугах по договорам |
Постановление Правительства Российской Федерации от 2 июля 2014 г. № 606 | О порядке разработки проформы договоров и типовых условий договоров, а также о случаях и условиях их применения | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 13 января 2014 г. № 19 | Об определении случаев, когда формула цены и максимальный договор цена указывается в закупочной документации при заключении договора. | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 29.07.2012 г.1186 от 19 декабря 2013 г. | Об определении размера контрактной цены, при превышении которой существенные положения контракта могут быть изменены по соглашению сторон на основании решения Правительства Российской Федерации. Федерация, высший исполнительный орган субъекта Российской Федерации и местная администрация, в случае прекращения исполнения договора без изменения по причинам, не зависящим от воли сторон | |
Постановление Правительства Российской Федерации Нет.1093 от 28 ноября 2013 г. | О порядке разработки и публикации отчета об исполнении государственного (муниципального) контракта и (или) результатах отдельного этапа такого исполнения в глобальной системе закупок | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 28 ноября 2013 г. № 1090 | Об утверждении порядка уменьшения количества товаров, объема работ или услуг при снижении цены договора | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 29.07.2012 г.1087 от 28 ноября 2013 г. | Об определении случаев заключения договоров жизненного цикла | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 28 ноября 2013 г. № 1084 | О порядке сопровождения реестра договоров, заключаемых клиентами, и реестра договоров, содержащих сведения, составляющие государственную тайну | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 25.07.2012 г.1071 от 26 ноября 2013 г. | Об утверждении Правил заключения государственных договоров на оказание товаров, работ, услуг для федеральных нужд на срок, превышающий срок утвержденных лимитов бюджетных обязательств | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 25 ноября 2013 г. № 1063 | Об утверждении Правил определения размера неустойки, взимаемой в случае халатного исполнения заказчиком или поставщиком (подрядчиком) договорных обязательств, за исключением просрочка исполнения обязательств заказчиком или поставщиком (подрядчиком), а также размер пени, начисленный за каждый день просрочки поставщиком (подрядчиком) обязательства по договору | |
Постановление Правительства Российской Федерации Нет.1011 от 11 ноября 2013 г. | Об утверждении Правил заключения федеральным органом исполнительной власти договоров с иностранными лицами на лечение граждан Российской Федерации за пределами территории Российской Федерации | |
Постановление Постановление Правительства Российской Федерации от 4 сентября 2013 г. № 775 | Об определении порога начальной (максимальной) цены контракта при закупке товаров, работ, услуг, выше которого в контрактах должны быть предусмотрены обязательства поставщика (подрядчика). ) для предоставления дополнительной информации клиенту | |
Приказ Федерального казначейства.От 28 ноября 2014 г. № 18н | Об утверждении Порядка действий клиентов по подготовке и предоставлению информации, подлежащей включению в реестр договоров, содержащих сведения, составляющие государственную тайну, и по предоставлению информации, уведомлений и протоколы собраний Федерального казначейства с клиентами | |
Приказ Минфина РФ от 24 ноября 2014 г. № 136н | О порядке сбора и обмена информацией и документами между клиента и Федерального казначейства в целях ведения реестра договоров, заключенных клиентом | |
Приказ Минздрава РФ от 21.07.2012 г.29н от 29 января 2014 г. | Об утверждении проформы договора с иностранным лицом на лечение граждан Российской Федерации за пределами территории Российской Федерации | |
КОНТРОЛЬ В СФЕРЕ ЗАКУПОК (статьи 99 — 102 Федерального закона № 44-ФЗ) | ||
Федеральный закон от 21 июля 2014 г. № 212-ФЗ | Об основаниях общественного контроля в Российской Федерации | |
Постановление Правительства Российской Федерации.От 10 февраля 2014 г. № 89 | Об утверждении Правил институционального контроля при закупках для федеральных нужд | |
Приказ Федеральной антимонопольной службы Российской Федерации от 19 ноября 2014 г. № 727/14 | Об утверждении Руководства Федеральной антимонопольной службы по реализации государственной функции рассмотрения жалоб на действия и бездействие клиентов, уполномоченных органов и учреждений, закупочных комиссий, их членов, сотрудников контрактных отделов , контрактные менеджеры, операторы электронных площадок, при выборе поставщика для федеральных и муниципальных нужд закупок | |
Приказ Минэкономразвития России №От 10 октября 2013 г. № 578 | Об утверждении порядка проведения обязательных общественных обсуждений закупок товаров, работ, услуг для федеральных и муниципальных нужд в случае стартовой (максимальной) цены контракта или из одних рук. цена контракта превышает 1 млрд руб. | |
ОТЧЕТНОСТЬ В СФЕРЕ ЗАКУПОК, РЕЕСТР ДОГОВОРОВ | ||
Постановление Правительства РФ №238 от 17 марта 2015 г. | О порядке подготовки отчетов об объемах закупок у субъектов малого бизнеса и социально-ориентированных некоммерческих организаций, публикации данных о потребностях в закупках в глобальной системе закупок, а также о внесении изменений в Положение о Межведомственной комиссии по отбору инвестиционных проектов, российских кредитных агентств и международных финансовых организаций для участия в Программе поддержки инвестиционных проектов, реализуемых на территории Российской Федерации с использованием проектного финансирования | |
Постановление Постановления Правительства РФ №1093 от 28 ноября 2013 г. | О порядке разработки и публикации отчета об исполнении государственного (муниципального) контракта и (или) результатах отдельного этапа такого исполнения в глобальной системе закупок | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 28 ноября 2013 г. № 1084 | О порядке ведения реестра договоров, заключаемых клиентами, и реестра договоров, содержащих сведения, составляющие государственную тайну | |
Приказ Казначейства Российской Федерации №18н от 28 ноября 2014 г. | Об утверждении Порядка действий клиентов по подготовке и предоставлению информации, подлежащей включению в реестр договоров, содержащих сведения, составляющие государственную тайну, и по представлению информации, уведомлений и протоколов встреч Федерального казначейства с клиентами | |
Приказ Минфина РФ от 24 ноября 2014 г. № 136н | О порядке сбора информации и документов и обмена ими между клиентом и Федерального казначейства в целях ведения реестра договоров, заключенных клиентом | |
Приказ Федеральной службы государственной статистики №От 12 ноября 2014 г. № 654 | Об утверждении статистического инструментария в целях организации федерального статистического наблюдения за закупочной деятельностью и выбора поставщиков для государственных и муниципальных закупок | |
Приказ Минфина России Российская Федерация № 142н от 30 декабря 2013 г. | О порядке представления и формате информации и документов, которые должны быть представлены клиентами до 1 июля 2014 г. для реестра договоров, заключаемых клиентами, и сведений для реестра. договоров, содержащих сведения, составляющие государственную тайну | |
Приказ Минфина Российской Федерации от 29.07.2012 г.127н от 18 декабря 2013 г. | О порядке предоставления, применения и изменения идентификационных кодов поставщика и банка для целей реистеринга договоров, заключаемых клиентами, реестра договоров, содержащих сведения, составляющие государственную тайну, и реестра банковских гарантий | |
ДРУГОЕ | ||
Постановление Правительства РФ №От 28 апреля 2015 г. № 753-р | О реализации статьи 111 Федерального закона от 5 апреля 2013 г. № 44-ФЗ «О контрактной системе федеральных и муниципальных закупок товаров, работ и услуг» | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 3 ноября 2015 г. № 1193 | О мониторинге закупок товаров, работ, услуг для федеральных и муниципальных нужд | |
R Постановление Правительства Российской Федерации Российская Федерация No.1261 от 27 ноября 2014 г. | Об утверждении Правил реализации древесины для производства древесины в рамках закупок работ по охране, защите и воспроизводству лесов | |
Постановление Правительства Российской Федерации Федерация от 9 января 2014 г. № 15 | Об утверждении Правил принятия решения о предоставлении получателю средств федерального бюджета права заключения договоров о предоставлении субсидии на капитальные вложения в объекты государственной собственности Российской Федерации. Российская Федерация на период, превышающий срок утвержденных лимитов бюджетных обязательств по предоставлению таких субсидий | |
Постановление Правительства Российской Федерации от 29.07.2012 г.13 от 9 января 2014 г. | Об утверждении Правил осуществления капитальных вложений в объекты государственного имущества Российской Федерации за счет средств федерального бюджета | |
Постановление Правительства Российской Федерации № 29 от 25 января 2008 г. | Об утверждении Правил определения цен на российское вооружение и военную технику, не имеющую российских аналогов и выпускаемую у единственного производителя |
Правовое сопровождение выполнения государственных и муниципальных подрядных работ
С 2005 года Юридическая фирма Aspect специализируется на обслуживании государственных клиентов, включая, в частности, юридическое сопровождение государственных закупок.Мы обладаем значительным опытом в этой уникальной сфере юридической практики. Наши юристы часто участвуют в различных спорах о государственных закупках, представляя как заказчиков, так и участников тендера; они могут быстро оценить любую ситуацию с точки зрения обращения в суд или разрешения спора с антимонопольным органом.
Мы не просто изучаем практику разрешения споров в сфере госзакупок — мы принимаем активное участие в ее формировании.
Имея значительный практический опыт в данной сфере, специалисты Юридической фирмы Аспект регулярно участвуют в семинарах и круглых столах, а также организуют тренинги и семинары по спорным вопросам применения Федерального закона № 44-ФЗ «О договорных отношениях». Система в сфере закупок товаров, работ, услуг для государственных и муниципальных целей и Федеральный закон № 223-ФЗ «О закупках товаров, работ, услуг различными юридическими лицами»
— юридическая помощь в составлении документации для участия в тендерах в соответствии с Федеральными законами 44-ФЗ и 223-ФЗ, в военных закупках и других видах тендеров;
— консультирование по вопросам заключения и исполнения договоров в соответствии с Федеральными законами 44-ФЗ и 223-ФЗ;
— обжалование действий организаторов торгов в антимонопольных органах и суде;
— защита интересов исполнителей контракта в суде, в том числе в случаях, когда заказчик отказывается от исполнения контракта, принимает выполненные работы или налагает штраф за нарушение условий.
Консультации с организаторами конкурса:
— анализ документации о закупке на предмет соответствия действующему законодательству;
— составление и внесение изменений в закупочную документацию;
— оптимизация закупочной документации: разработка требований к участникам конкурса и алгоритмов оценки заявок.
Если Ваши права были нарушены при участии в тендере, мы готовы оказать комплексное юридическое сопровождение в защите Ваших интересов в Антимонопольной службе и арбитражном суде.
Юридическая защита прав участников тендера эффективна и оправдана при условии наличия профессиональных и опытных юрисконсультов . Специалисты Юридической фирмы Аспект активно участвуют в разрешении соответствующих споров в антимонопольных органах и хорошо владеют всей спецификой этих дел.
— отмена в Федеральной антимонопольной службе незаконного отказа от участия в тендере
— отмена в Федеральной антимонопольной службе условий договора, противоречащих действующему законодательству;
— об отмене необоснованного отказа Заказчика от заключения договора;
— защита интересов исполнителя контракта в Федеральной антимонопольной службе при рассмотрении вопроса о включении информации в Реестр недобросовестных поставщиков.
Защита прав участников тендера на пути к заключению контракта — один из самых сложных вопросов, так как многое зависит от участников — их способности своевременно подать и предоставить всю необходимую документацию, обосновать свою позицию с юридической точки зрения. рассмотреть и привлечь профессиональных и опытных юристов для защиты своих интересов.
Закон о договорной системе 44-ФЗ: конференции, семинары и другие мероприятия9 октября 2014 года в Государственной Думе Тюмени прошла V ежегодная юридическая конференция Западно-Сибирской юридической палаты « Новинки законодательства 2014: новые правила ведения бизнеса» .
Юридическая фирма Управляющий партнер Аспект Степан Матаев представил отчет «Спорные вопросы при применении Закона о договорной системе № 44-ФЗ: первые результаты », охватывающий следующие моменты: предотвращение попадания в реестр недобросовестных поставщиков при наличии банковской гарантии приостановление, нарушение условий оплаты контракта, спорные основания отказа в заключении контракта, возможность снижения ответственности за нарушение договорных обязательств и т. д.
По итогам конференции в Государственную Думу внесена законодательная инициатива по определению исключений при внесении учредители реестра — Российская Федерация, государственные органы и др.и рассмотреть поправки к Федеральному закону 44-ФЗ, исключающие возможность злоупотреблений со стороны потребителей при необоснованном внесении имен участников конкурса в Реестр недобросовестных поставщиков в случае одностороннего отказа от исполнения контракта.
Соответствующий закон подготовили специалисты Юридической фирмы Аспект .
2 октября 2013 года в Тюменской областной Думе прошла IV ежегодная юридическая конференция Западно-Сибирской палаты адвокатов под названием Федеральный закон «О договорной системе в сфере государственных и муниципальных закупок» — Новинки и пути реализации .
Управляющий партнер ЮФ Аспект Степан Матаев представил отчет Проблемы заключения государственных и муниципальных договоров . В своем докладе он рассказал о наиболее актуальных спорных вопросах заключения договоров на примерах судебной практики в 2013 году, а также раскрыл пути решения этих вопросов на основе нового Федерального закона «О договорной системе — № 44-ФЗ».
В январе 2014 года в официальном журнале Арбитражного суда Западно-Сибирского округа Судебная практика в Западной Сибири была опубликована статья управляющего партнера Юридической фирмы Аспект Степана Матаева Проблемы заключения государственных и муниципальных договоров Примеры судебной практики 2013.Судебная практика Западной Сибири публикует тематические обзоры судебной практики в Арбитражном суде Западно-Сибирского округа, а также акты арбитражных судов и судов общей юрисдикции Западно-Сибирского округа с анализом и комментариями.
Специалисты в этой сфере
Степан Матаев (Управляющий партнер)
Статья 44 Федерального закона № 44-ФЗ с комментариями и изменениями.
ФЗ № 44 регулирует отношения, направленные на обеспечение муниципальных и государственных нужд по повышению эффективности закупок, прозрачности и прозрачности, предотвращению коррупции и других злоупотреблений.Нормативный акт регулирует деятельность, связанную с планированием сделок, определением подрядчиков, поставщиков, исполнителей, заключением договоров и выполнением их условий. Подача заявок на организацию аукционов и конкурсов регулируется статьей 44 Федерального закона-44. Комментарии к норме можно найти ниже.
Разъяснения дополнений и изменений к норме
В действующей (действующей на 2016 год) редакции закона статья 44 содержит изменения, внесенные в нее в 2013-2014 годах.В 2015-2016 гг. дополнения к рассматриваемой норме не вносились и корректировкам не подвергались. Статья 44 44-ФЗ в редакции 2013-2014 гг. Действует и в исправленном виде присутствует в последней редакции от 3 июля 2016 г. Между тем в другие положения нормативного акта внесены дополнения, внесенные в 2015-2016 гг.
Особенности положения
В процессе проведения аукционов / конкурсов статья 44 ФЗ-44 требует, чтобы заказчик установил требование о защите приложений.В документации должен быть указан ее размер и условия гарантии банка (если такой метод применяется в соответствии с рассматриваемым нормативным актом). Подача заявки на закрытый аукцион или тендер может быть обеспечена за счет зарабатывания денег участником или посредством банковской гарантии. Метод выбирает сам испытуемый. Подача заявок для участников электронных аукционов осуществляется исключительно путем внесения денежных средств. Банковская гарантия не должна противоречить требованиям ст.45 Федерального закона № 44. Срок его действия составляет не менее 2 месяцев. с даты окончания приема заявок. Требования по обеспечению участия в определении подрядчика, поставщика в равной степени распространяются на всех участников закупки.
Важный момент
Если участник заявки представил подтверждение вклада в качестве обеспечения и до дня рассмотрения и проверки заявок, они не поступают на указанный заказчиком счет, учитывающий операции с финансами, считается не предоставленной гарантией.Это правило не действует при организации электронного аукциона.
Возврат залога
Статьей 44 44-ФЗ установлены случаи, когда денежные средства, предоставленные участником в качестве гарантий, возвращаются ему или освобождаются от блокировки (во время аукционов на электронных площадках). Сроки возврата залога также определяются в норме. В соответствии со ст. 44 ФЗ-44 «О договорной системе в сфере закупок» перевод денежных средств или снятие блокировки производится:
- При подписании протокола рассмотрения и проверки заявлений, их вторых частей для участия в закрытом / электронный аукцион.Возврат или прекращение блокировки производится в отношении денежных средств всех участников, кроме победителя процедуры определения подрядчика / поставщика / подрядчика. Обратный перевод ему делается после подписания договора. Этот пункт введен в редакцию от 01.01.2014.
- Отмена определения подрядчика, поставщика или подрядчика.
- Отклонение заявки участника.
- Исключение предмета из определения поставщика, подрядчика или подрядчика или отказ от заключения договора с победителем в соответствии с положениями ч. 9 и 10 ст.44 44-ФЗ «О контрактной системе».
- Заявка подлежит рассмотрению до истечения срока ее подачи или получения после ее завершения.
Кроме того, Федеральным законом от 4.06.2014 № 140 внесен пункт с указанием другой причины возврата денежных средств. Реализуется при получении заказчиком решения надзорного органа об отказе согласовать заключение договора с единственным исполнителем, подрядчиком или поставщиком. В статье 44 Федерального закона-44 указано, что денежные средства необходимо перечислить не позднее пяти дней.Замок разблокируется в течении 1 рабочего дня. В случае отстранения участника от определения поставщика, подрядчика или подрядчика, а также отказа от заключения договора с победителем гарантия банка не возвращается, взыскание с нее не удерживается.
Специфика перевода
Статьей 44 Федерального закона-44 предусмотрено, что денежные средства, оформленные в виде обеспечения заявки, при организации и проведении электронного аукциона направляются на счет оператора сайт в банке.Прибыль, полученная последним от размещения средств, подлежит выплате. Доходы от средств, принимаемых в обеспечение электронных торгов, переводятся с момента блокировки до вывода на основании договора, подписанного оператором с каждым участником при аккредитации.
Требования к банкам
Рассматриваемый нормативный акт устанавливает, что для учета выполнения операций, связанных с обеспечением участия в электронном аукционе, на счет оператора площадки открываются л / с участников.Статья 44 44-ФЗ с изменениями, внесенными нормативным актом № 396, требует финансовой устойчивости банковских организаций. Они также устанавливаются в отношении размера капитала, прибыльности, активов, ликвидности и структуры собственности. Требования распространяются на банки, в которых оператор сайта открывает счета для учета денежных средств, предоставленных участниками в качестве обеспечения. Перечень таких финансовых структур, правила заключения и условия договоров об оказании услуг устанавливаются государством.Банк и оператор, открывшие счета для учета денег в залог, несут солидарную ответственность за соблюдение условий возврата денег, указанных выше.
Особенности блокировки
С учетом ст. 44 ФЗ-44 с изменениями, следует отметить, что замораживание средств, производимое участником электронного аукциона для обеспечения заявки, прекращается оператором в тех же случаях, что и возврат средств на закрытом мероприятии. При этом должны соблюдаться единые требования к функционированию электронных площадок.Они определены в соответствии с частью 4 статьи 59 Федерального института исполнительной власти.
Исключения
В ст. 44 ФЗ-44 с изменениями 2013-2014 гг. Бывают случаи, когда возврат денежных средств, внесенных участником в качестве обеспечения, не производится. К ним относятся:
- Отказ или уклонение субъекта от заключения договора.
- Непредоставление или предоставление с нарушением условий, установленных статьей 44 Федерального закона 44-ФЗ, до подписания договора.
- Отзыв или изменение участником заявки в определении подрядчика, поставщика, подрядчика по истечении срока, отведенного для ее подачи.
В случае организации и проведения электронного депозита денежные средства, внесенные в виде обеспечения, переводятся на счет, указанный клиентом, где фиксируются операции с поступившими к нему деньгами или выплачиваются суммы банковской гарантии. при возникновении вышеуказанных обстоятельств.
Размер взноса
В статье 44 44-ФЗ указано, что размеры должны составлять от 0,5 до 5% от начальной (максимальной) стоимости контракта. Если он составляет не более 3 миллионов рублей, то размер вклада составляет 1% от цены. Если покупка осуществляется в соответствии с положениями статей 28-30 рассматриваемого нормативного акта, и предприятие или учреждение уголовно-исполнительной системы (пенитенциарной системы), субъект малого бизнеса, организация инвалидов или социально-правовая организация ориентированного на некоммерческое общество, размер обеспечения не должен превышать 2% от максимальной суммы контракта.
44-ФЗ, статья 44: комментарии к части 15
В качестве участников предоставляются предприятия и учреждения МИС, действующие в льготных условиях. Они определены 28 статьей рассматриваемого закона. В п. 2, в частности, установлено следующее. При определении исполнителей, подрядчиков, поставщиков заказчик должен предоставить предприятиям / учреждениям МИС преимущества по отношению к предлагаемой стоимости контракта до 15%. Это делается по правилам, установленным государством в соответствии с утвержденными перечнями работ, товаров и услуг.Исключение составляют случаи, когда сделки заключаются с одним подрядчиком, поставщиком, исполнителем. Информация об этом должна быть указана заказчиком в уведомлениях о проведении закупок и документации на услуги, работы и продукцию, включенную в соответствующие списки. Если предприятие / учреждение МИС признано победителем, по его просьбе может быть заключен договор по предложенной им стоимости с учетом преимуществ. Однако цена не должна быть выше максимальной (начальной), указанной в уведомлении.
Заявление
Ее допуск к аукциону рассматривается как указание субъекта оператору сайта заблокировать операции по его л / с. В течение часа после получения заявления счет, открытый для проведения операций по его обеспечению, должен быть заморожен. Исключение составляет случай, предусмотренный пунктом 5 части 11 статьи 66.
Возврат заявки
Осуществляется при отсутствии счета участника, открытого для проведения операций, связанных с обеспечением, требуемая сумма, по которой блокировки не было.Заявку возвращает оператор сайта. Он должен сделать это в течение часа после получения. В течение 1 дня с момента возврата участнику заявки в случаях, установленных пп. 1-4 пункта 11 66-го пункта, оператор обязан прекратить блокировку операций, произведенных в соответствии с ч. 18 ст. 44, в отношении средств, предоставленных в качестве обеспечения. При отзыве заявки на участие в электронном аукционе по правилам, установленным ч. 14 ст.66 и часть 9 ст. 69, слесарь тает л / с. Данная процедура также проводится в течение 1 дня (рабочего), следующего за днем получения уведомления.
Размораживание денежных средств
В течение 1 рабочего дня, следующего за датой получения оператором протокольной площадки, указанной в части 6 статьи 67, блокировка счета, открытого для операций, связанных с обеспечением безопасности заявки участника, не производится. допущен к торгам, снимается. Аналогичное правило применяется к субъекту 1 / s, который не участвовал в мероприятии по независящим от него причинам.Размораживание осуществляется в течение суток, следующих за датой размещения протокола аукциона на электронной площадке. В тот же период устанавливается разблокировка счета, открытого для операций, связанных с предоставлением участника, подавшего заявку, которая признана не соответствующей требованиям, изложенным в организационной документации. Исключение составляет случай, который определен частью 27 статьи 44 Федерального закона 44-ФЗ.
Мониторинг государственных закупок.Экспресс-тендеры
Мониторинг государственных закупок и экспресс-тендеры включает информацию о размещенных государственных закупках. Основным преимуществом базы данных является скорость отображения информации (обновление происходит онлайн, при обработке / вставке новой информации).
Мониторинг государственных закупок и экспресс-конкурсов включает информацию обо всех закупках лекарственных средств для обеспечения государственных нужд в соответствии с Федеральным законом от 05.04.2013 № 44-ФЗ «О контрактной системе при закупке товаров, работ». , услуг для обеспечения государственных и муниципальных нужд, а также с Федеральным законом от 18.07.2011 № 223-ФЗ «О закупке товаров, работ, услуг отдельными видами юридических лиц».
Для формирования базы данных автоматически загружается информация с сайта zakupki.gov.ru (new.zakupki.gov.ru) в режиме нон-стоп.
Информация о новых тендерах загружается в систему каждый час. Вся автоматически загруженная информация отражается в экспресс-базе данных.
Для обеспечения полного сбора данных также используются следующие платформы: Тендерная система Сбербанка_AST, Единая электронная торговая площадка, Общероссийская электронная торговая система (Заказ РФ), Электронная торговая площадка России (Тендер РТС), Электронная торговая площадка. Платформа государственных закупок (ETF ММВБ), торги 223.
База данных содержит следующие поля и критерии:
- Федеральный округ
- Область
- Административно-территориальная единица
- Номер покупки: уникальный номер покупки, соответствующий номеру сайта zakupki.gov.ru
- Тип федерального закона (44-ФЗ или 223-ФЗ)
- Способ покупки: способ размещения покупки (запрос цен, электронный аукцион и т. Д.)
- Название сайта: Название Интернет-сайта
- Адрес сайта: Адрес Интернет-страницы
- Название покупки: Название приобретенного товара, соответствующее его названию на сайте
- Этап закупки: статус закупки (Подача, Закупка завершена и т. Д.). Этот параметр обновляется согласно статусу на сайте
- Дата подачи заявки: дата размещения заказа на поставку на сайте
- Дата завершения: дата проведения аукциона в электронном виде или дата вскрытия конвертов запросов котировок
- Срок подачи заявок
- Ссылка на покупку: ссылка на покупку на сайте
- Дата доставки товара или завершения работ или график оказания услуг: крайний срок доставки товара, указанный на сайте
- Номер лота
- Начальная цена контракта: начальная (максимальная) цена покупки
- Источник финансирования: средства финансирования покупки
- Наименование приобретаемого товара: описание товара к отправке, указанное при оформлении покупки в разделе «Общая информация».После проверки оператором информация заменяется описанием из прилагаемых документов, содержащим наиболее полное описание товара
- Полное наименование организации: полное наименование организации, разместившей заказ на поставку
- Сокращенное наименование организации — сокращенное наименование организации, разместившей заказ на поставку
- Ссылка на организацию: ссылка на реестр организаций на zakupki.gov.ru
- Код ОГРН: код ОГРН организации
- ИНН: ИНН организации, оформляющей покупку
- КПП (Налоговый регистрационный код): КПП организации, совершающей закупку
- Адрес регистрации: адрес регистрации организации, совершающей покупку
- Почтовый адрес: почтовый адрес организации, совершившей покупку.
- E-Mail: адрес электронной почты организации, совершающей покупку
- Website: название сайта организации, совершающей покупку
- Контактное лицо: представитель организации, оформляющей закупку
- Количество: количество товара указанное в описании покупки
- Единица измерения: единица измерения, указанная в описании закупки
- Сумма: общая сумма покупки товара
Информация о новых конкурсах загружается в систему каждый час.Вся информация, которая загружается автоматически, отражается в базе данных.
Указанная информация обрабатывается и проверяется оператором на предмет правильного заполнения наименования покупаемого товара. Новая и измененная информация появляется с последующим обновлением в Экспресс-базе данных государственных закупок лекарственных средств в Российской Федерации.
Информацию можно получить по дате, региону, реквизитам компании-покупателя, а также по ключевым словам в полях Название закупки и / или Название закупленных товаров.
: 2020 :: Решения Верховного суда штата Делавэр :: Прецедентное право штата Делавэр :: Закон штата Делавэр :: Закон США :: Justia
VAMA F.Z. Co. против Pacific Control Systems :: 2020 :: Решения Верховного суда штата Делавэр :: Прецедентное право Делавэра :: Закон штата Делавэр :: Закон США :: Justia Justia › Закон США › Прецедентное право › Прецедентное право Делавэра › Решения Верховного суда Делавэра › 2020 г. › ВАМА Ф.Z. Co. против Pacific Control Systems Получайте бесплатные ежедневные сводки новых заключений Верховного суда Делавэра. Подписаться Скачать PDF В ВЕРХОВНОМ СУДЕ ШТАТА ДЕЛАВАР ВАМА Ф.З. CO., Истец Ниже, Заявитель, против PACIFIC CONTROL SYSTEMS (L.L.C.) И ДИЛИП РАХУЛАН, Ответчики ниже, Апелляции.§ § § § § § § § § § § § № 487, 2019 Нижний суд — Высший суд штата Делавэр C.A. №: N18J-07-985 Отправлено: 17 июня 2020 г. Решено: 26 августа 2020 г. Перед главным судьей SEITZ; ВАЛИХУРА и МОНТГОМЕРИ-РИВЗ, судьи. ПОРЯДОК После тщательного рассмотрения записок сторон и протокола апелляции Суд считает, что: (1) Настоящая апелляция исходит от заявителя, Вама Ф.З. Co. («Вама»), усилия по принуждению иностранного судебного решения против подателя апелляции, Pacific Control Systems («Pacific»), в соответствии с Законом Делавэра о едином признании денежных судебных решений в иностранных государствах («Закон о признании»).1 Верховный суд, среди прочего, отказался признать иностранное судебное решение в соответствии с доктриной res judicata. Для 1 10 Del. C. § 4801 et seq. по причинам, изложенным ниже, мы согласны с тем, что доктрина res judicata запрещает Высшему суду признавать иностранное судебное решение, и подтверждаем это на этом основании. (2) Pacific — технологическая компания со штаб-квартирой в Техно-парке в Дубае. В 2014 году Pacific стремилась построить центр обработки данных и обратилась к Vama с просьбой помочь в финансировании проекта.Vama ссудил Pacific часть денег для финансирования центра обработки данных2. Но в начале 2016 года Pacific начал испытывать финансовые проблемы и объявил дефолт по кредиту. 1 мая 2016 года Дилип Рахулан, главный исполнительный директор и исполнительный председатель Pacific, отправился в Соединенные Штаты, где и остался3. (3) В это время Pacific сохранил команду по реструктуризации для рассмотрения потенциальных требований кредиторов. 4 В мае 2016 года Vama уведомила Pacific о том, что у Vama есть претензия к Pacific в связи с неуплатой ссуды для центра обработки данных.Представители 5 Pacific заверили Vama, что его средства в безопасности и Pacific выплатит всю ссуду, но Pacific так и не вернул ссуду.6 (4) Когда эти усилия по взысканию не увенчались успехом, Vama подал иск и получил временное вложение в суд Дубая. первой инстанции. Вама также инициировал гражданский процесс в суде первой инстанции Дубая против Pacific и Rahulan. Приложение к открытию Br. 316-17 (далее «А_»). A777. 4 A337. 5 А319. 6 А18-25. 2 3 2 («Ответчики»), чтобы оформить временное вложение и получить окончательное решение о неуплате ссуды.14 августа 2016 года Вама подал повестку на обслуживание, адресованную Пасифик и Рахулану, в «Дубай, Бур-Дубай, улица Шейха Зайда, TP 101423, Технопарк, тел: 048869000, мобильный: 05045, электронная почта: [email protected]». 7 23 августа 2016 г. суд Дубая уведомил о возбуждении иска; в доказательстве оказания услуг указано, что агент суда доставил уведомление «Адиэль Гаванико в ее качестве регистратора» по телефону «Бур Дубай-Шейх Зайед, дорожный телефонный номер: 0506539145» 8. Но Пасифик и Рахулан не участвовали в разбирательстве в Суд первой инстанции Дубая.17 января 2017 года Суд первой инстанции Дубая вынес решение за неисполнение обязательств в отношении Ответчиков, подтвердив временное наложение ареста и обязав ответчиков выплатить 21 852 500 дирхамов ОАЭ плюс проценты и гонорары адвокатов («Решение Дубая»). 9 11 июня 2017 г. Pacific и Rahulan обжаловали решение Дубайского суда, утверждая, что обслуживание было ненадлежащим. Но Апелляционный суд Дубая отклонил апелляцию Pacific и Rahulan как несвоевременную, поскольку право на апелляцию было «аннулировано» через тридцать дней после вынесения решения Дубая.10 7 А38. A41, 43. 9 A100-19. 10 А141-46. 8 3 (5) 18 октября 2018 г. Вама подал иск в Верховный суд штата Делавэр с требованием отменить решение Дубая в соответствии с Законом о признании. Пасифик и Рахулан возражали против признания в Делавэре и предложили отменить решение Дубайского суда на том основании, что решение было результатом мошенничества и не соответствовало надлежащей правовой процедуре. Дело было передано Уполномоченному, который провел предварительное слушание 14 декабря 2018 г.11 и слушание по доказательствам 16 мая 2019 г.12 На слушании по доказательствам Рахулан выступал в качестве генерального директора Pacific, отрицая свою осведомленность о лежащей в основе долга компании Vama, и заявил, что ни он, ни Pacific не были должным образом обслужены в судебном разбирательстве по делу Дубая. Фактически, Рахулан показал, что он впервые узнал о судебном разбирательстве в суде Дубая в мае 2017 года, после того, как было вынесено решение Дубая.13 (6) Между тем, 8 ноября 2018 года Вама инициировал процесс признания и введения в действие решения Дубайского решения на основании Единый закон штата Нью-Джерси о признании денежных судебных решений за рубежом.14 После завершения расследования по делу Нью-Джерси Ответчики подали ходатайство о вынесении решения в порядке упрощенного судопроизводства в отношении непризнания решения Дубайского решения. 15 Приложение к ответу Br. 1-40 (далее «Б_»). A423-661. 13 A191-92, 496, 779. 14 A779; N.J. Stat. Аня. § 2A: 49A-16.6 и последующие. 15 A777. 11 12 4 (7) 27 февраля 2019 г., когда продолжались разбирательства по делу о признании в Делавэре и Нью-Джерси, суд первой инстанции Дубая снял Рахулана с поста председателя Pacific из-за широко распространенного мошенничества и бесхозяйственности («Распоряжение о высылке Рахулана»).16 В мае и июне 2019 года Вама направил два письма в Верховный суд с просьбой о возобновлении производства по делу о высылке Рахулана. Вама подчеркнул, что удаление Рахулана поставило под сомнение способность Рахулана давать показания от имени Pacific во время судебного разбирательства в Делавэре17. Но комиссар не предоставил этой компенсации. Вместо этого 30 августа 2019 года комиссар удовлетворил ходатайство Пасифик и Рахулана об отклонении и / или отмене решения Дубайского суда («Мнение комиссара»).Основываясь в основном на показаниях Рахулана, Заключение комиссара определило, что ответчики не получали уведомления о разбирательстве в Дубае. 18 Комиссар также отметил, что Вама «никогда не предъявлял Суду Дубая никаких доказательств наличия основных долговых обязательств» Тихоокеанского региона перед Вамой.19 (8) 16 сентября 2019 года Вама подала письменные возражения против заключения Комиссара.20 В своих возражениях, Вама утверждал, что Комиссар неправильно переложил бремя доказывания на Ваму, чтобы продемонстрировать надлежащее уведомление и 16 A212-28.А662-91. 18 Открытие Br. Бывший. 1. 19 Id. в 18. 20 A744-74. 17 5 обоснованность долга Pacific перед Vama.21 Vama также запросила совещание по статусу и уведомила Верховный суд о том, что будет стремиться получить и представить дополнительные доказательства.22 Между тем, 24 сентября 2019 года суд Нью-Джерси удовлетворил ходатайство ответчиков. для упрощенного судебного разбирательства («Постановление штата Нью-Джерси») из-за отсутствия надлежащей правовой процедуры в ходе разбирательства в Дубае23. 30 сентября 2019 года ответчики подали возражение против возражений истца в Делавэре и приложили приказ штата Нью-Джерси.24 (9) После этого Верховный суд отклонил ходатайства Вамы о созыве конференции и представлении дополнительных доказательств. Вместо этого 22 октября 2019 года Верховный суд постановил, что Указ штата Нью-Джерси отклонил иск Вамы в Делавэре в соответствии с доктриной res judicata.25 Кроме того, Верховный суд постановил, что увольнение было уместным, поскольку Указ штата Нью-Джерси противоречил закону Дубая. Решение.26 Вама подал своевременное уведомление об апелляции, оспаривая постановление Верховного суда. (10) Этот суд рассматривает толкование закона судом первой инстанции, в том числе его постановление о том, что res judicata запрещает иск de novo.27 Мы рассматриваем фактические данные для 21 Id. A787-89. 23 А781-86. 24 В434-79. 25 Открытие Br. Бывший. 2. 26 Id. 27 ООО «РБК Капитал Мкц.» Против Образов. Ссудный фонд IV, 87 A.3d 632, 639 (Del. 2014). 22 6 были ли такие выводы «явно ошибочными или не результатом упорядоченного и логического дедуктивного процесса рассуждений». 28 (11) «Доктрина res judicata гласит, что окончательное решение по существу, вынесенное судом компетентной юрисдикции, может быть установлен как препятствие к поддержанию второго иска в другом суде по тому же делу между теми же сторонами.29 Доктрина res judicata запрещает подачу иска, когда (1) суд первой инстанции обладал юрисдикцией в отношении предмета дела и сторон; (2) стороны в первоначальном иске были такими же, что и эти стороны, или в частном порядке, в деле в баре; (3) первоначальная причина иска или решенные вопросы были такими же, как и в случае в баре; (4) вопросы в предварительном иске должны быть решены против апеллянтов в деле в баре; и (5) указ в предыдущем иске был окончательным. (12) При апелляции возражения Вамы в отношении анализа res judicata Верховного суда сосредоточены исключительно на том, являются ли вопросы в действиях Нью-Джерси и Делавэра одинаковыми.Вама утверждает, что Орден штата Нью-Джерси не запрещает его претензию в Делавэре в соответствии с res judicata, поскольку судебный процесс в Делавэре касается иных юридических вопросов, чем те, которые рассматриваются судом Нью-Джерси.31 В частности, Вама утверждает, что «[t] удаление [] Рахулана из [Pacific] является диспозитивным вопросом », который« фундаментально изменяет [s] правовую теорию [Pacific] в противовес признанию Kahn v. Lynch Commc’ns Sys., Inc., 638 A.2d 1110, 1114 (Del. 2002) ). Мотт против государства, 49 A.3d 1186, 1189 (Дел.2012). 30 Dover Historical Soc., Inc. против Городской комиссии по планированию Дувра, 902 A.2d 1084, 1092 (Del. 2006). 31 Открытие Br. 34-37. 28 29 7 решения Дубая в Делавэре и правовой теории Вамы в отношении ее способности противодействовать попыткам ответчиков отменить решение Дубайского решения в Делавэре »32. и Делавэр был свидетельством Рахулана о том, что ни один из Ответчиков не получил должного уведомления о действиях в Дубае.33 Однако приказ о высылке значительно подорвал доверие к Рахулану и лишил Рахулана каких-либо полномочий говорить от имени Тихого океана в любой юрисдикции. Поскольку никто не имел права выступать от имени Pacific, Вама утверждает, что он имел право на вынесение решения по умолчанию в отношении Pacific в обеих юрисдикциях. Вама узнал о приказе о высылке только после слушания доказательств в Делавэре и утверждает, что ни Верховный суд, ни суд Нью-Джерси полностью не рассмотрели эти новые вопросы.34 (13) Когда «новые факты порождают совершенно иную правовую теорию. . . это не было ни представлено, ни решено в первом [окончательном постановлении] », res judicata не применяется35. Но здесь дело обстоит не так. Даже согласившись, arguendo, с утверждением Вамы о том, что Верховный суд исключит показания Рахулана, это исключение не повлияет на анализ суда res judicata, поскольку он не изменит ключевых правовых теорий, рассмотренных Высшим судом. 32 Id. на 35-36. A496. 34 Открытие Br. 2, 35-36.35 Dover Historical Soc., 902 A.2d at 1092. 33 8 (14) Теория Вамы ошибочно предполагает, что показания Рахулана являются единственными доказательствами, подтверждающими нарушения надлежащей правовой процедуры. Суд Нью-Джерси основал свое решение на рассмотрении документальных доказательств, представленных Вамой, а не на показаниях Рахулана36. Анализируя надлежащую правовую процедуру, суд Нью-Джерси отметил, что «единственными документами, представленными в подтверждение уведомления о судебном разбирательстве [Дубая]», были «Предполагаемое доказательство обслуживания обоих Ответчиков.37 Но, «[в] он якобы извещении Рахулану говорится, что что-то было вручено ‘Адиэль Гаванико в ее качестве регистратора’» 38. Таким образом, «Вама должен занять позицию, что если это действительная услуга, то американская обязанность стандарты процесса соблюдаются, если истец вручает вызов и жалобу на лицо секретарю по месту работы этого лица. Это явно не соответствует нашему пониманию надлежащей правовой процедуры »39. Что касается Pacific, суд штата Нью-Джерси постановил, что закон штата Нью-Джерси« требует обслуживания процессуальных действий корпорации должностным лицом, директором, доверительным управляющим, управляющим или генеральным агентом, лицом, назначенным по закону или лицо, уполномоченное принимать услуги или отвечающее за этот офис.40 В системе надлежащей правовой процедуры штата Нью-Джерси услуга не может быть 36 A783-86. A784-85. 38 A785. 39 Id. 40 Id. 37 9 достигается путем сдачи бумаг у входной двери »41. Таким образом, суд Нью-Джерси основал свое решение на доказательстве служебного документа, а не на показаниях Рахулана. (15) Компания Vama представила в Верховный суд то же доказательство служебного документа, что и в суд Нью-Джерси, и Делавэр применяет в основном те же требования к уведомлению, что и Нью-Джерси42. Таким образом, даже если показания Рахулана были исключены полностью, Верховному суду по-прежнему необходимо будет изучить те же доказательства предоставления услуг и решить тот же вопрос надлежащей правовой процедуры, который постановление штата Нью-Джерси разрешило в отношении Вамы.43 Вама не может объяснить, как дальнейшее рассмотрение приказа о высылке Рахулана представит новые факты, которые коренным образом повлияют на анализ надлежащей правовой процедуры, запрещающий его требование. Таким образом, Верховный суд не допустил ошибки, применив res judicata, несмотря на существование постановления о высылке Рахулана. (16) Далее Вама утверждает, что res judicata неприменима, потому что Нью-Джерси применяет другое бремя доказывания в соответствии с Законом о признании.44 И Нью-Джерси, и Делавэр применяют почти идентичные версии Закона о признании.45 В обоих государствах «[сторона], сопротивляющаяся признанию судебного решения иностранного государства, должна иметь 41 Id. Сравните N.J. Ct. Р. 4: 4-4 (а) (1), (6) с Дел. Супер. Кт. Civ. R. 4 (f) (1) (I), (III) и Алстон против Хадсона, Джонса, Джейворка, Уильямса и Лигуори, 2000 г., WL 275673, at * 2 (Дел. 7 марта 2000 г.). 43 А781-86. 44 Открытие Br. 36-37. 45 Сравните N.J. Stat. Аня. § 2A: 49A-16.4, с 10 Del. C. § 4803. 42 10 бремя установления этого основания для непризнания. . . существует »46. В Нью-Джерси, однако, когда иностранное судебное решение является вынесенным по умолчанию, бремя доказывания перекладывается на истца, чтобы доказать, что ответчик был доставлен в соответствии с законами страны происхождения.47 Напротив, в Делавэре такого перекладывания бремени не происходит.48 Применяя свою версию Закона о признании, суд Нью-Джерси постановил, что «[b] поскольку решение [Дубай] было вынесено без участия Ответчика», бремя перешло к Ваме, чтобы показать, что он служил Ответчикам в соответствии с законодательством ОАЭ49. Вама утверждает, что, поскольку Нью-Джерси переложил бремя доказывания на Ваму, а Делавэр этого не сделал, res judicata не применяется. (17) Но в данном случае смещение бремени доказывания не повлияло на Орден Нью-Джерси.Суд Нью-Джерси принял как истинные все фактические утверждения Вамы и основал свое решение о непризнании на том, что доказательство оказания услуги в ходе разбирательства в Дубае не соответствовало «нашему пониманию надлежащей правовой процедуры», поскольку вручение уведомления секретарю неприемлемо50. стандарты надлежащей правовой процедуры для уведомления и обслуживания по существу одинаковы в штатах Делавэр и Нью-Джерси, 46 Id. N.J. Stat. Аня. § 2A: 49A-16.4 (d). 48 См. 10 Del. C. § 4803 (d). 49 А783-84. 50 A785 («Утверждалось, что ОАЭ считают это достаточной надлежащей правовой процедурой, и этого должно быть достаточно.Нет. Этот тип процесса «противоречит государственной политике этого штата или Соединенных Штатов»). 47 11 Высший суд не допустил ошибки в применении res judicata, несмотря на разницу в распределении бремени между законами о признании. (18) Наконец, Высший суд не злоупотребил своим дискреционным правом, отклонив запросы Вамы, касающиеся заключения Уполномоченного, и не принял во внимание мнение Уполномоченного по существу. Обоснование заключения Уполномоченного не имело отношения к основанию увольнения Верховным судом.Кроме того, поскольку иск «Вамы» был отклонен решением суда другого штата, дополнительные доказательства, относящиеся к существу отклоненного иска, не имеют отношения к делу. ТЕПЕРЬ ПОЭТОМУ ПРИКАЗЫВАЕТСЯ ПОДТВЕРЖДЕНИЕ решения Высшего суда. В СУДЕ: / s / Тамика Р. Монтгомери-Ривз Джастис 12Ошибка 404 — Eversheds International
К сожалению, мы не можем найти страницу, которую вы искали.
Вы могли попасть на эту страницу по разным причинам. Если вы ввели веб-адрес напрямую, проверьте правильность написания.
Недавно мы изменили дизайн нашего веб-сайта. Если вы перешли по ссылке с другого веб-сайта или использовали закладку, страница могла быть перемещена в новое место. Пожалуйста, ознакомьтесь с нашим новым сайтом и посмотрите, сможете ли вы найти то, что искали http://www.eversheds.com/.
Die von Ihnen aufgerufene Seite kann leider nicht gefunden werden.
Dies kann verschiedene Gründe haben: Wenn Sie die Webadresse selbst eingegeben haben, überprüfen Sie bitte die richtige Schreibweise.
Wir haben kürzlich unsere Веб-сайт umgestaltet. Wenn Sie über einen Link einer anderen Website auf diese Seite gelangt sind oder ein Lesezeichen verwendet haben, kann es sein, dass die Seite auf eine neue Adresse umgezogen ist. Bitte schauen Sie sich nach den von Ihnen gesuchten Informationen auf unserer neuen Веб-сайт um: http: //www.eversheds.com /.
Lo sentimos, no hemos encontrado la página que busca.
Puede haber llegado hasta esta página por diversas razones. Si ha escrito una dirección web directamente, compruebe si la ha escrito bien.
Hemos rediseñado nuestra página web hace poco. Si ha seguido un enlace desde otra página web o utilizado un marcador, es posible que la página haya cambiado de sitio. Изучите nuestra nueva página para ver si puede encontrar lo que buscaba en http: //www.eversheds.com /.
抱歉 , 无法 找到 您 所 需要 的 网页。
出现 这种 情况 的 原因 有 很多。 如果 您 直接 输入 , 请 检查 拼写 是否 正确
最近 , 。 如果 您 从 其他 网站 的 链接 进入 或 使用 了 , 该 网页 可能 已 转移 至 的 地址。 请 查看 我们 的 新 网址 http://www.eversheds.com/ , 看看 找到 您 需要 的网页。
Désolés, mais la page require n’a pu être Trouvée.
Vous avez pu être redirigé vers cette page pour plusieurs raisons. Si vous avez saisi l’adresse du site internet, veuillez vérifier qu’elle a été correctement orthographiée.
Nous avons récemment reconçu notre site Интернет.Если у вас есть право собственности на сайт в Интернете, то вы можете найти его на печатной странице, если это возможно. Veuillez naviguer sur notre nouveau site для поиска подробной информации http://www.eversheds.com/.
Градиент-независимая передача сигналов Wnt инструктирует асимметричную обрезку нейритов у C. elegans
Introduction
Развитие нервной системы — это высокодинамичный процесс, который включает нейрогенез, миграцию клеток, поляризацию нейронов и рост нейронных процессов.Также хорошо известно, что нейроны изначально расширяют избыточное количество нейритов, большинство из которых позже будет устранено с помощью механизма, называемого отсечкой нейритов (Riccomagno and Kolodkin, 2015; Schuldiner and Yaron, 2015). Нарушение обрезки нейритов приводит к избыточному ветвлению и связанности нейронов, что может лежать в основе различных неврологических состояний, включая макроцефалию (Jan and Jan, 2010). Методы визуализации in vivo позволили выяснить генетические и молекулярные механизмы, лежащие в основе отсечения нейронов.
Во время очистки нейронов нейриты часто конкурируют друг с другом за свои клетки-мишени в зависимости от активности, а вытесненные нейриты удаляются путем обрезки. Например, каждое мышечное волокно трапециевидной мышцы мыши изначально иннервируется несколькими двигательными нейронами на ранней постнатальной стадии, в то время как аксоны с более слабой синаптической силой отсекаются с помощью механизма, называемого отщеплением аксосом (Bishop et al., 2004; Colman et al., 1997). Нейриты также конкурируют за трофические факторы.Аксоны симпатических нейронов грызунов получают фактор роста нервов (NGF), секретируемый клетками-мишенями для их выживания, индуцируя нейротрофический фактор головного мозга (BDNF), который, в свою очередь, вызывает обрезку вытесненных аксонов (Deppmann et al., 2008; Singh и др., 2008).
Помимо зависимой от активности обрезки, многие нейриты подвергаются стереотипной обрезке во время развития (Schuldiner and Yaron, 2015). Было показано, что несколько сигнальных молекул играют решающую роль в этом процессе.В гиппокампе мышей хеморепеллент семафорин 3F (Sema3F) экспрессируется в дистальной инфрапирамидной области и локально индуцирует отсечение аксонов инфрапирамидного тракта (IFT) через рецепторный комплекс PlexinA3-Neuropilin2 (Bagri et al., 2003; Sahay et al., 2003) . Neuropilin2 связывает и активирует β2-Chimaerin, RacGEF, чтобы инактивировать Rac1 GTPase, чтобы вызвать отсечение аксонов IFT (Riccomagno et al., 2012). Интересно, что потеря β2-химерина специфически влияет на обрезку аксонов IFT, но не имитирует другие фенотипы Sema3F или PlexinA2, такие как наведение аксонов.Следовательно, Sema-Plexin может использовать специфический нижестоящий сигнальный каскад для управления сокращением нейритов, который отличается от его роли в ведении аксонов и формировании синапсов.
Обрезка нейритов также играет решающую роль в формировании половой диморфной нервной цепи. Экспрессия BDNF из мезенхимы молочных желез необходима для иннервации сенсорных аксонов молочных желез. У мужчин, но не у женщин, усеченная изоформа рецептора TrkB экспрессируется в мезенхиме молочной железы, что лишает BDNF доступности для сенсорных аксонов, тем самым вызывая специфическое для мужчин обрезание аксонов (Liu et al., 2012). Недавняя работа показала, что передача сигналов Sema-Plexin действует как сигнал сокращения для этих сенсорных аксонов, поскольку экспрессия Sema6A и Sema3D в молочной железе вызывает сокращение сенсорных аксонов через PlexinA4 (Sar Shalom et al., 2019).
Wnt представляет собой секретируемый морфоген, распределение градиента которого играет критическую роль на различных стадиях развития животных (Bartscherer and Boutros, 2008; Yang, 2012). Передача сигналов Wnt также важна для развития нервной системы, включая нейрогенез, поляризацию нейронов, рост нейритов, ведение аксонов и формирование синапсов (He et al., 2018; Инестроса и Варела-Наллар, 2015; Парк и Шен, 2012). Тем не менее, его роль в сокращении нейритов все еще ограничена. В Caenorhabditis. elegans , было показано, что фактор транскрипции MBR-1 / Mblk-1 необходим для отсечения избыточных нейритов интернейронов AIM (Kage et al., 2005), функции которых противодействует трофическая роль Wnt. передача сигналов (Hayashi et al., 2009). Также было показано, что передача сигналов Wnt действует как «про-ретракционный» сигнал в контралатерально проецируемых серотонин-иммунореактивных дейтероцеребральных интернейронах (CSDns) у Drosophila (Singh et al., 2010). Еще предстоит определить, играет ли передача сигналов Wnt инструктивную или разрешающую роль в сокращении нейритов.
В настоящем исследовании мы описываем не зависящую от градиента передачу сигналов Wnt в инструкциях по обрезке стереотипных онтогенетических нейритов холинергического мотонейрона PDB у C. elegans. На основе генетического анализа мы обнаружили, что экспрессия LIN-44 / Wnt в гиподермальных клетках хвоста дает команду на отсечение нейритов PDB, растущих по направлению к гиподермальным клеткам хвоста. Неожиданно, связанного с мембраной LIN-44 / Wnt достаточно для индукции отсечения нейритов PDB, что позволяет предположить, что градиентное распределение LIN-44 не является существенным для отсечения нейритов.Во время этого процесса LIN-44 / Wnt направляет асимметричную локализацию своего рецептора LIN-17 / Frizzled и внутриклеточного сигнального компонента DSH-1 / Disheveled в задние отсекающие нейриты. Взятые вместе, мы обнаружили новую независимую от градиента передачу сигналов Wnt в инструкциях по сокращению нейритов в процессе развития.
Результаты
Асимметричная обрезка нейритов во время развития PDB
PDB представляет собой постэмбриональный холинергический мотонейрон, происходящий из клетки нейроэктобласта P12 (Sulston and Horvitz, 1977), и его клеточное тело находится в преанальном ганглии.У гермафродитов PDB направляет один нейрит кзади к области кончика хвоста, где он делает резкий «V-образный» поворот, чтобы присоединиться к дорсальному нервному канатику, чтобы сформировать проходных синапсов на мышцы дорсальной стенки тела (рис. 1А). Хотя функция PDB не была охарактеризована, недавнее исследование, сочетающее математическое моделирование и эксперимент по удалению клеток, выявило роль PDB в координации движений (Walker et al., 2017). Чтобы исследовать развитие нейритов PDB, мы сначала создали трансгенный штамм, в котором нейриты PDB и пресинапсы помечены привязанным к мембране GFPnovo2, более ярким вариантом GFP (Hendi and Mizumoto, 2018) и геном синаптического пузырька, rab- 3 , слитый с mCherry, экспрессируемым под промотором kal-1 (Bülow et al., 2002) (см. Материалы и методы) (Рисунок 1A).
Рис. 1. PDB нейриты подвергаются стереотипной асимметричной обрезке во время развития.( A ) Структура PDB, помеченная mizIs9. PDB отросток и пресинаптические сайты помечены маркером пресинаптических везикул GFPnovo2 :: CAAX (зеленый) и mCherry :: RAB-3 (пурпурный) соответственно. ( B ) Количественная оценка количества задних нейритов (p-нейритов) в полусинхронизированных популяциях N2 на стадиях L2 и L4 соответственно.( C ) Типичные изображения события отсечения задних нейритов у одного животного на стадиях L2 и L4. Области задних нейритов увеличены на правой панели. Звездочки обозначают тело клетки PDB. Белые и желтые стрелки обозначают конец переднего и заднего нейритов соответственно. ( D ) количественная оценка количества задних нейритов у 24 животных на стадиях L2 и L4. ( E ) Схема асимметричного отсечения нейритов во время развития PDB. Зеленые и красные стрелки обозначают растущие и сокращающиеся нейриты.Масштабные линейки: 10 мкм.
Нейрон PDB удлиняет свой единственный нейрит на поздних стадиях L1 и L2. Чтобы понять, как нейриты PDB достигают V-образного поворота, мы сначала исследовали структуру развивающихся нейритов PDB, используя популяцию полусинхронизированных животных (рис. 1B). Интересно, что мы наблюдали, что нейрон PDB имеет уникальную временную структуру на стадии L2: вентральный нейрит посылает крошечную комиссуру на дорсальную сторону червя, где он раздваивается, чтобы распространить один нейрит назад и один вперед (Рисунок 1C: верхние панели ).Поэтому нейрон PDB часто имеет «H-образную» структуру с двумя задними нейритами (один дорсальный нейрит и один вентральный нейрит) на ранней стадии L2 (Рисунок 1B). В отличие от этого, нейрон PDB у большинства животных L3 / L4 не содержал заднего нейрита (Рисунки 1A и 1B). Это наблюдение предполагает, что задние нейриты, наблюдаемые на стадии L2, являются временными структурами, большая часть которых сокращается на стадии L4. Чтобы подтвердить, что задние нейриты, которые присутствуют на стадии L2, действительно обрезаются во время развития, мы отобрали 24 животных L2 с хотя бы одним задним нейритом в PDB и повторно исследовали его структуру на стадии L3 / L4 (через 24 часа после первого обследования). (Рисунки 1C и 1D).Среди пятнадцати животных, у которых было два нейрита на стадии L2, у десяти животных не было заднего нейрита, а у пяти животных был один нейрит на стадии L3 / L4. Среди девяти животных с одним задним нейритом на стадии L2 у семи животных не было заднего нейрита, а у двух животных был один нейрит на стадии L3 / L4. В общей сложности 82,1% (32/39) нейритов, которые мы наблюдали на стадии L2, были обрезаны в течение 24 часов.
Нейроны могут обрезать свои нейриты, втягивая или отсекая их (Schuldiner and Yaron, 2015).Чтобы определить, какой механизм PDB-нейрон использует для отсечения своих задних нейритов, мы провели покадровую визуализацию во время отсечения задних нейритов и обнаружили, что задний нейрит становился короче по мере развития, в то время как передний дорсальный нейрит продолжал расти (дополнительный рисунок 1). Это указывает на то, что задние нейриты отсекаются за счет ретракции, а не отсечения с последующей деградацией. Чтобы определить, зависит ли сокращение PDB от нейрональной активности, мы исследовали мутанты unc-13 , которые необходимы для слияния синаптических везикул и высвобождения нейротрансмиттеров (Richmond et al., 1999). Мы не наблюдали каких-либо структурных дефектов в PDB, таких как эктопические задние нейриты у мутантов unc-13 , что позволяет предположить, что сокращение нейритов PDB не зависит от нейрональной активности (рис. 2E). Взятые вместе, наши наблюдения показывают, что V-образный поворот нейрита PDB достигается за счет асимметричной отсечения задних, но не передних нейритов в поворотной точке во время развития PDB (Figure 1E).
Дополнительный рисунок 1. Покадровая визуализация отсечения нейритов PDB.НейритPDB помечен маркером mizIs9 . Снимки делались каждые 5 минут. Зеленые стрелки обозначают конец переднего нейрита в первом и последнем кадре, а желтые стрелки обозначают конец задних нейритов во время двух событий обрезки. Масштабные линейки: 10 мкм.
Рисунок 2. lin-44 / wnt , экспрессируемый рядом с задними нейритами PDB, необходим для развития PDB.( A и B ) Типичные изображения нейрита PDB, меченного mizIs9 (верхние панели), lin-44- экспрессирующих клеток, меченных P lin-44 :: BFP (средние панели) и объединенные изображения ( нижние панели) на стадии L4 ( A ) и во время отсечения задних нейритов (стадия L2) ( B ).Белые и желтые стрелки обозначают передний и задний нейриты соответственно. ( B ’) Поперечный разрез трех положений нейритов PDB (обозначенных красными пунктирными линиями в B ) воссоздан из изображений z-стека, показанных в B . Пунктирными кружками выделены нейриты PDB и клетки, экспрессирующие lin-44-. ( C ) Схема ( B ). Зеленая линия представляет нейриты PDB. ( D ) Репрезентативные изображения PDB с задними нейритами (верхняя панель) и другими дефектами (дефекты направления: нижняя панель) у мутантов lin-44 .Желтые стрелки обозначают задние нейриты, а красные стрелки указывают на то, что передние нейриты не достигли дорсального нервного канатика. ( E ) Количественная оценка дефектов PDB на этапе L4. Номера образцов показаны над каждой полосой. Масштабные линейки: 10 мкм.
LIN-44 / Wnt необходим для асимметричной обрезки нейритов в PDB
Далее мы попытались идентифицировать молекулярный сигнал, который инструктирует обрезку задних нейритов в PDB. Недавняя работа показала, что руководство и рост нейрита PDB нарушены у мутантов передачи сигналов Wnt и протеогликанов синдекана (Saied-Santiago et al., 2017). Wnt представляет собой семейство высококонсервативных секретируемых гликопротеинов, которые играют ключевую роль в развитии животных (Nusse, 2005). Wnt действует через рецепторы, включая Frizzled, LRP5 / 6 и рецептор тирозин-киназу (Ryk). При связывании Wnt эти рецепторы выполняют отдельные нижестоящие каскады через многодоменный белок Disheveled (Sawa and Korswagen, 2013; van Amerongen and Nusse, 2009).
Предыдущие работы показали, что lin-44 / wnt экспрессируется в гиподермальных клетках в области кончика хвоста (рис. 2A), где он ингибирует разрастание аксонов и образование синапсов, а также контролирует полярность нейронов и асимметричное деление клеток ( Герман и др., 1995; Хиллиард и Баргманн, 2006; Классен и Шен, 2007; Маро и др., 2009). Поэтому мы исследовали относительное положение нейритов PDB и клеток, экспрессирующих lin-44-, меченных синим флуоресцентным белком (BFP), экспрессируемым под промотором lin-44 во время развития. Поразительно, что на стадии L2, когда PDB задние нейриты подвергаются отсечке, мы обнаружили, что отсекающий задний нейрит был расположен в непосредственной близости от самой задней гиподермальной клетки, hyp10 (Figures 2B and 2C).Интересно, что мы заметили, что hyp10 часто показывает самую яркую экспрессию BFP среди lin-44- клеток, экспрессирующих на стадии L2. Положение задних нейритов PDB и hyp10, которые экспрессировали высокий уровень lin-44 , хорошо согласуется с нашим предсказанием, что lin-44 / wnt является сильным кандидатом в качестве сигнала сокращения. Затем мы исследовали, затронута ли обрезка задних нейритов на фоне нулевых мутантов lin-44 . На этапе L4 примерно 32.3% (21/65) из lin-44 (n1792) нулевых животных показали дефекты определения клеточной судьбы (без PDB), дефекты нейрональной полярности (нейрит PDB простирается вперед) и дефекты наведения аксонов (рисунок 2D, нижняя панель и Данные не показаны ). Мы исключили их из нашей количественной оценки, потому что эти фенотипы не позволяли нам исследовать дефекты обрезки нейритов. Среди мутантных животных lin-44 без очевидной клеточной судьбы, нейрональной полярности или дефектов управления у 68,2% (30/44) из них были обнаружены эктопические задние нейриты в PDB на стадии L4, что указывает на дефектную обрезку нейритов во время развития PDB ( Рисунки 2D и 2E).Чтобы проверить, нарушена ли обрезка задних нейритов у мутантов lin-44 , мы сравнили структуру PDB того же животного в двух временных точках развития: второй личиночной (L2) и последней личиночной (L4) стадиях (рис. 3A). и 3D). Как и ожидалось, мы действительно наблюдали, что только 22,9% (8/35) задних нейритов, наблюдаемых у животных на стадии L2, обрезаются на стадии L3 / L4 у мутантов lin-44 , что значительно ниже, чем у животных дикого типа. (82,1%) (Рисунки 3C и 3D).Этот результат убедительно свидетельствует о том, что lin-44 / wnt необходим для отсечения задних нейритов во время развития PDB.
Рис. 3. lin-44 / wnt и lin-17 / fz необходимы для отсечения заднего нейрита.( A и B ) Репрезентативные изображения одиночных животных мутантов lin-44 (n1792) ( A ) и lin-17 (n671) ( B ) в L2 (верхние панели) и L4 (нижние панели) ступени. Звездочки обозначают тело клетки PDB.Белые и желтые стрелки обозначают передний и задний нейриты соответственно. ( D ) Количественная оценка количества задних нейритов у 24 животных на стадиях L2 и L4. Обратите внимание, что количественная оценка N2 приведена на рисунке 1. ( D ) Количественная оценка частоты отсечения задних нейритов. *** p <0,001; n.s., не значимо (хи-квадрат с поправкой Йейтса). Масштабные линейки: 10 мкм.
lin-17 / fz действует клеточно-автономно в PDB, вызывая отсечение нейритовLIN-44 / Wnt использует LIN-17 / Frizzled (Fz) в качестве первичного рецептора во многих контекстах (Hilliard and Bargmann, 2006; Klassen и Шен, 2007; Сава и др., 1996). Затем мы проверили, играет ли lin-17 / fz роль в сокращении нейритов в PDB. В то время как нуль-мутанты lin-17 (n671) показали значительно более тяжелую судьбу, полярность или дефекты наведения, чем мутанты lin-44 / wnt (рис. 2D), мы наблюдали аналогичные дефекты отсечения задних нейритов, как у мутантов lin-44 . : только 9,7% задних нейритов (3/31) были обрезаны через 24 часа после стадии L2 (Рисунки 3B-3D). Дефект обрезки в лин-44 ; lin-17 двойные мутанты существенно не отличались от каждого одиночного мутанта (14.3% задних нейритов были обрезаны), что позволяет предположить, что lin-44 и lin-17 действуют по одному и тому же генетическому пути (рисунки 3C и 3D). Этот результат согласуется с идеей, что lin-17 / fz является основным рецептором для lin-44 / wnt при отсечении нейритов PDB. Мы также провели тканеспецифические эксперименты по спасению, чтобы проверить, функционирует ли lin-17 автономно в клеточной структуре PDB. Экспрессия кДНК lin-17 либо с пан-нейронального промотора (P rgef-1 ), либо с промотора PDB (P kal-1 ) значительно устраняла дефекты обрезки мутантов lin-17 , предполагая, что lin-17 действует автономно от клеток в PDB (дополнительный рисунок 2).Эти результаты показывают, что LIN-17 / Fz является рецептором, который функционирует в PDB для получения сигнала LIN-44 / Wnt для индукции отсечения нейритов.
Дополнительный рисунок 2. lin-17 / fz действует автономно от ячейки в PDB.( A ) Количественная оценка числа задних нейритов отдельных животных на стадиях L2 и L4 у мутантов lin-17 и мутантов lin-17 со спасательными трансгенами. Обратите внимание, что количественная оценка мутантов lin-17 приведена на рисунке 3. ( B ) Количественная оценка частоты отсечения задних нейритов.*** p <0,001; ** p <0,002 (критерий хи-квадрат с поправкой Йетса).
LIN-44 / Wnt, но не EGL-20 / Wnt, инструктирует отсечение нейритов PDB
Поскольку lin-44 / wnt экспрессируется кзади от нейритов PDB, возможно, что LIN-44 действует как инструктивный сигнал для PDB обрезка нейритов. С другой стороны, он также может действовать как разрешающий сигнал для отсечения нейритов PDB. Чтобы различить эти две возможности, мы провели эксперимент по спасению путем эктопической экспрессии LIN-44 с использованием промотора другого гена wnt , egl-20 . egl-20 / wnt экспрессируется в клетках вокруг преанальных ганглиев (Whangbo and Kenyon, 1999). Если LIN-44 / Wnt действует как инструктивный сигнал, его экспрессия из передних клеток с использованием промотора egl-20 не спасет дефект обрезки PDB у нулевых мутантов lin-44 . Если он действует как разрешающий сигнал, мы ожидаем увидеть восстановление дефектов отсечения нейритов PDB независимо от того, где экспрессируется lin-44 . Мутанты lin-44 с внехромосомным массивом Ex [P egl-20 :: lin-44 ] не спасали дефекты обрезки у нулевых мутантов lin-44 (31.8%, n = 22) (Рисунки 4A и 4B). С другой стороны, трансген, экспрессирующий lin-44 из промотора lin-44 (Ex [P lin-44 :: lin-44 ]), полностью устранял дефекты обрезки (80%, n = 20) до уровня дикого типа (Рисунки 4A и 4B). Этот результат предполагает, что lin-44 / wnt является поучительным сигналом для отсечения задних нейритов в PDB.
Рис. 4. lin-44 , но не egl-20 инструктирует отсечение нейритов в PDB.( A ) Количественная оценка числа задних нейритов отдельных животных на стадиях L2 и L4 у мутантов lin-44 и мутантов lin-44 со спасательными трансгенами.Обратите внимание, что количественная оценка мутантов lin-44 приведена на фиг. 3. Нижние панели представляют собой схемы, показывающие домен экспрессии lin-44 (зеленый) и egl-20 (пурпурный) в каждом генотипе. ( B ) Количественная оценка коэффициента отсечения задних нейритов. *** p <0,001; n.s., не значимо (хи-квадрат с поправкой Йейтса).
egl-20 / wnt часто действует совместно и дублированно с lin-44 / wnt в различных событиях развития (Mizumoto and Shen, 2013; Yamamoto et al., 2011). Поэтому мы проверили, может ли egl-20 / wnt заменить функцию lin-44 при отсечении нейритов PDB. Интересно, что экспрессия egl-20 под промотором lin-44 не устраняет дефекты обрезки нейритов PDB у животных с нулевым мутантом lin-44 , что указывает на функциональную дивергенцию между lin-44 и egl- 20 при обрезке нейритов (Рисунки 4A и 4B). Соответственно, структура PDB в значительной степени не затрагивается у мутантов egl-20 (n585) и его рецепторов mig-1 / fz и cam-1 / Ryk (фигура 2E и данные не показаны ) (Eisenmann, 2005; Мизумото, Шен, 2013).Взятые вместе, мы заключаем, что LIN-44 является уникальным поучительным сигналом для отсечения нейритов PDB.
Привязанный к мембране LIN-44 достаточен для инструктирования обрезания нейритов PDB
Генетические эксперименты, такие как эктопическая экспрессия или сверхэкспрессия Wnts, и прямая визуализация белка Wnt показали критическую роль градиентного распределения LIN-44 и EGL- 20 в C. elegans (Coudreuse, 2006; Klassen, Shen, 2007; Maro et al., 2009; Mizumoto, Shen, 2013; Pani, Goldstein, 2018).Хотя данные вышеупомянутых экспериментов согласуются с идеей, что lin-44 / wnt инструктирует асимметричную обрезку нейритов в PDB, некоторые наблюдения не могут быть объяснены инструктивной ролью LIN-44 как градиента. Во-первых, мы не наблюдали эктопическую обрезку переднего нейрита, когда lin-44 / wnt экспрессировался спереди от промотора egl-20 (данные не показаны), что позволяет предположить, что передняя экспрессия lin-44 недостаточна. чтобы вызвать отсечение передних нейритов в PDB.Во-вторых, во время развития PDB как растущие передние, так и отсекающие задние нейриты располагаются рядом с lin-44-, экспрессирующей hyp10 клеткой (Figure 2B). Если lin-44 / wnt функционирует как сигнал сокращения градиента, как может передний нейрит ускользнуть от сигнала сокращения? Одно из возможных объяснений состоит в том, что нейритам PDB требуется высокая и локальная концентрация LIN-44 / Wnt для индукции сокращения, а не ответа на градиентное распределение LIN-44. В этом случае клетки, экспрессирующие Pegl-20 :: lin-44 , находятся слишком далеко от переднего нейрита PDB.Более того, тщательное изучение пространственной взаимосвязи между нейритами PDB и экспрессирующими клетками lin-44 позволяет предположить, что сигнал GFP от кончика заднего нейрита PDB перекрывается с сигналом BFP от hyp10, в то время как между кончиком переднего нейрита имеется промежуток. и hyp10 (рисунок 2B). Это вызывает одну возможность того, что нейриты PDB должны находиться в очень непосредственной близости, если не в контакте, с клетками, экспрессирующими LIN-44, для активации механизма сокращения. Чтобы проверить эту гипотезу, мы использовали привязанный к мембране Wnt, первоначально разработанный в Drosophila (Zecca et al., 1996). В Drosophila слитая конструкция трансмембранного белка типа II Neurotactin (Nrt) и Wingless / Wnt (Nrt-Wg) используется для характеристики независимой от градиента роли Wingless / Wnt (Alexandre et al., 2014; Baena). -Lopez et al., 2009). Важно отметить, что мутантная муха, у которой эндогенный Wg был заменен на Nrt-Wg , была жизнеспособной без серьезных морфологических дефектов (Alexandre et al., 2014). Они также показали, что Nrt-Wg в значительной степени отменил градиентное распределение Wingless.Эти наблюдения указывают на то, что градиентное распределение Wnt не является существенным для нормального развития. Мы создали мутантное животное с привязанным к мембране lin-44 , вставив нейротактин с оптимизированными кодонами (Nrt) и BFP в эндогенный локус lin-44 с помощью CRISPR / Cas9 ( miz56 [ nrt-bfp-lin -44 ]) (Фиг.5А). Сигнал BFP наблюдался на мембране гиподермальных клеток хвоста, включая hyp10, что позволяет предположить, что слитые белки NRT-BFP-LIN-44 локализованы на поверхности клеток, экспрессирующих lin-44- (фиг. 5B).Более яркий сигнал BFP наблюдался на границе раздела между гиподермальными клетками, вероятно, потому, что сигнал исходит от обеих гиподермальных клеток. Интересно, что мы наблюдали значительную долю nrt-bfp-lin-44 животных, имеющих нормальные структуры PDB на стадии L4 ( данных не показаны, ). В частности, в отличие от нулевых мутантов lin-44 , мы наблюдали нормальную обрезку задних нейритов у nrt-bfp-lin-44 животных (65,6%, n = 32), сопоставимых с диким типом (рисунки 5C-5E).Это указывает на то, что привязанного к мембране LIN-44 достаточно, чтобы вызвать нормальную обрезку нейритов в PDB.
Рис. 5. Привязанного к мембране LIN-44 достаточно, чтобы вызвать отсечение задних нейритов в PDB.( A ) Геномная структура локуса lin-44 в мутантах nrt-bfp-lin-44 (miz56) . ( B ) Субклеточная локализация Nrt-BFP-LIN-44 у взрослого животного. Максимальная проекция (верхняя панель) и одинарная плоскость (нижняя панель) из изображений z-стека. Стрелки обозначают сигнал Nrt-BFP-LIN-44 на мембране.( C ) Типичные изображения, показывающие активность обрезки в nrt-bfp-lin-44 (miz56) . ( D ) Количественная оценка числа задних нейритов у 22 отдельных животных на стадиях L2 и L4 у мутантов nrt-bfp-lin-44 (miz56) . ( E ) Количественная оценка частоты отсечения задних нейритов. *** p <0,001; n.s., не значимо (хи-квадрат с поправкой Йейтса). Масштабные линейки: 10 мкм.
В дополнение к традиционной модели образования градиента Wnt путем простой секреции и химической диффузии, в недавних работах были начаты работы по выявлению альтернативных способов транспорта Wnt через цитонемы и внеклеточные везикулы (EV) (Gross et al., 2012; Рутледж и Шольпп, 2019; Saha et al., 2016; Stanganello et al., 2015). Следовательно, возможно, что связанный с мембраной Wnt все еще способен создавать градиент и достигать клеток-мишеней издалека через эти структуры. Чтобы проверить, отменяет ли NRT-BFP-LIN-44 градиентное распределение LIN-44, мы исследовали фенотипы двух мотонейронов (DA9 и DD6), которые, как известно, регулируются градиентным сигналом LIN-44 / Wnt. Нейрон DA9 представляет собой холинергический мотонейрон, тело клетки которого находится в преанальном ганглии.Аксон DA9 первоначально проходит кзади вдоль брюшного нервного канатика и через комиссуру присоединяется к дорсальному нервному канатику, где затем проходит вперед, образуя проходных синапсов на мышцы дорсальной стенки тела. Предыдущие работы показали, что градиент LIN-44 / Wnt из гиподермальных клеток хвоста ингибирует образование синапсов в задней аксональной области DA9, создавая бессинаптический (или асинаптический) аксональный домен (рисунки 6A и 6D) (Klassen and Shen, 2007). ). У нулевых мутантов lin-44 образование эктопических синапсов происходит в дорсальном заднем аксональном домене DA9 (Фигуры 6B и 6D).LIN-17 :: mCherry локализуется в асинаптическом заднем аксональном домене lin-44- зависимым образом (Фигуры 6A и 6B, средние панели ). Избыточная экспрессия lin-44 из промотора egl-20 создает более крупный асинаптический домен за счет смещения синапсов DA9 более кпереди, предполагая, что градиент LIN-44 определяет длину асинаптического домена (Klassen and Shen, 2007). Точно так же прекращение прорастания аксонов ГАМКергического мотонейрона DD6 в спинном нервном канатике зависит от градиента LIN-44 (Maro et al., 2009). У дикого типа аксон DD6 обрывается до того, как достигает области прямой кишки (рисунки 6E и 6F). У lin-44 нулевых мутантов он выходит за пределы прямой кишки (Фигуры 6E и 6F). Сверхэкспрессия lin-44 из промоторов lin-44 или egl-20 вызвала преждевременную остановку отростка аксона DD6 (Maro et al., 2009). Эти два явления, зависящие от lin-44 и , были серьезно нарушены у животных nrt-bfp-lin-44 и были неотличимы от таковых у нулевых мутантов lin-44 (Фигуры 6C-6F).Эти результаты убедительно свидетельствуют о том, что связанный с мембраной LIN-44 серьезно нарушает зависимую от градиента функцию LIN-44. Эти результаты согласуются с идеей о том, что отсечение задних нейритов PDB зависит не от градиента LIN-44, а от локальной и высокой концентрации LIN-44, непосредственно экспонируемой клетками, экспрессирующими lin-44 .
Рис. 6. Привязанный к мембране LIN-44 не может работать как градиентный сигнал.( AC ) Репрезентативные изображения пресинаптических специализаций DA9, помеченные GFP :: RAB-3 (верхние панели), локализация LIN-17 :: mCherry (средние панели) и объединенные изображения (нижние панели) в N2 ( A ) , лин-44 (n1792) ( B ) и nrt-bfp-lin-44 (miz56) ( C ) животных.Звездочки обозначают тело клетки DA9, а желтые линии представляют задний асинаптический домен дорсального аксона DA9. ( D ) Количественная оценка длины асинаптического домена DA9. Каждая точка представляет собой отдельное животное. Планки погрешностей указывают среднее значение ± SEM. *** p <0,001; n.s., не значимо (односторонний дисперсионный анализ). ( E ) Типичное изображение заднего аксона DD6 в N2 (верхняя панель), lin-44 (n1792) (средняя панель) и nrt-bfp-lin-44 (miz56) (нижняя панель). Звездочки обозначают положение прямой кишки; стрелки обозначают конец аксона DD6.( F ) Количественная оценка дефекта разрастания аксона DD6. Животных считали дефектными, если окончание аксона DD6 располагалось кзади от прямой кишки. *** p <0,001; н.с., не значимо (критерий хи-квадрат). ( G ) Схема относительного положения нейронов DD6, DA9, PDB и клеток, экспрессирующих lin-44 . Светлый оранжевый цвет представляет собой гипотетический градиент LIN-44. Масштабные линейки: 10 мкм.
lin-44 / wnt инструктирует асимметричную локализацию LIN-17 / Fz и DSH-1 / Dsh в сокращающихся нейритах.Лиганды Wnt активируют внутриклеточный сигнальный каскад, индуцируя кластеризацию рецепторов.Соответственно, рецепторы Frizzled локализованы в месте действия Wnt-зависимым образом. Например, LIN-17 / Fz локализуется асимметрично в коре клетки во время асимметричного деления клеток, в заднем нейрите механосенсорного нейрона PLM во время поляризации нейронов и в заднем асинаптическом аксональном домене, чтобы ингибировать пресинаптическую сборку (Goldstein et al., 2006; Хиллиард, Баргманн, 2006; Классен, Шен, 2007). Поэтому мы исследовали субклеточную локализацию слитого белка LIN-17 :: GFP во время отсечения задних нейритов PDB.Мы наблюдали значительно более высокое накопление LIN-17 :: GFP puncta на кончике задних нейритов по сравнению с таковым в переднем нейрите на стадии L2 (Фигуры 7A и 7D). Асимметричная локализация LIN-17 :: GFP в задних нейритах зависит от lin-44 / wnt : мы не наблюдали значимых точек LIN-17 :: GFP у животных с нулевым мутантом lin-44 (рисунки 7B и 7D). Напротив, LIN-17 :: GFP puncta накапливались в задних нейритах PDB у nrt-bfp-lin-44 животных (Фигуры 7C и 7D).Это согласуется с отсутствием явных дефектов обрезки у животных nrt-bfp-lin-44 . Мы отмечаем, что точки LIN-17 :: GFP, наблюдаемые в вентральном нейрите животных дикого типа, полностью отсутствовали у животных nrt-bfp-lin-44 (Фигуры 7A и 7C). Эти точки LIN-17 :: GFP могут быть связаны с зависимой от градиента функцией lin-44 , такой как поляризация и наведение нейронов.
Рисунок 7. Wnt-зависимая локализация LIN-17 в задних нейритах PDB.( AC ) Репрезентативные изображения локализации LIN-17 :: GFP (верхние панели), структуры нейритов PDB, помеченной цитоплазматическим BFP (средние панели) и объединенные изображения (нижние панели) в N2 ( A ), lin- 44 (n1792) ( B ) и nrt-bfp-lin-44 (miz56) ( C ) животных соответственно. Увеличенные изображения верхушки передних и задних нейритов показаны на правой панели. ( D ) Количественная оценка нормализованного отношения сигналов GFP / BFP на переднем и заднем конусах роста.Планки погрешностей указывают среднее значение ± SEM. *** p <0,001; n.s., не значимо (парный t-критерий отношения).
Disheveled (Dsh / Dvl) белки являются внутриклеточными компонентами передачи сигналов как канонической, так и неканонической передачи сигналов Wnt и, как известно, совместно локализуются с активными рецепторами Frizzled (Wallingford and Habas, 2005). В C. elegans есть три гена Disheveled ( dsh-1, dsh-2 и mig-5 ). Подобно рецепторам Frizzled, белки Dsh часто асимметрично локализуются внутри клеток Wnt-зависимым образом (Heppert et al., 2018; Классен и Шен, 2007; Мизумото и Сава, 2007; Walston et al., 2004). Мы не наблюдали значительных дефектов обрезки у животных с одним мутантом dsh-1 и mig-5 , вероятно, из-за их функциональной избыточности (данные не показаны). Тем не менее, DSH-1 / Dsh :: GFP puncta были локализованы в задних нейритах у дикого типа и nrt-bfp-lin-44 , но не у lin-44 нулевых животных (дополнительные рисунки 3A, 3B, 3D и 3E). В соответствии с идеей, что белки Dsh рекрутируются на активные рецепторы Frizzled, локализация DSH-1 в задних нейритах зависела от рецептора LIN-17 / Fz (дополнительные рисунки 3C и 3E).Объединив эти результаты вместе, мы пришли к выводу, что локально ограниченный Wnt инструктирует асимметричную обрезку нейритов посредством рекрутирования Frizzled рецептора и Disheveled белков на сокращающиеся нейриты (Рис. 8).
Дополнительная фигура 3. Wnt-зависимая локализация DSH-1 / Dsh в задних нейритах PDB.( AD ) Репрезентативные изображения локализации DSH-1 :: GFP (верхние панели), структуры нейритов PDB, помеченной цитоплазматическим BFP (средние панели) и объединенные изображения (нижние панели) в N2 ( A ), lin- 44 (n1792) ( B ), lin-17 (n671) ( C ) и nrt-bfp-lin-44 (miz56) ( D ) животных соответственно.Увеличенные изображения верхушки передних и задних нейритов показаны на правой панели. ( E ) Количественная оценка нормализованного отношения сигналов GFP / BFP на переднем и заднем конусах роста. Планки погрешностей указывают среднее значение ± SEM. *** p <0,001; n.s., не значимо (парный t-критерий отношения).
Рис. 8. Модель асимметричного отсечения нейритов в PDB.LIN-44 / Wnt из гиподермальной клетки хвоста (hyp10) индуцирует обрезку нейритов PDB посредством рекрутирования LIN-17 / Fz и DSH-1 / Dsh в диком типе (левая панель) и дефектной обрезки у мутантов lin-44 (правая панель) ).
Discussion
Обрезка нейритов развития играет решающую роль в формировании функциональной нейросети, но мало что известно о сигнальных сигналах, которые инструктируют стереотипное обрезание нейритов во время развития нейронов. Здесь мы обнаружили, что сигнал Wnt от гиподермальных клеток инструктирует стереотипное обрезание нейритов в холинергическом моторнейроне PDB у C. elegans . Асимметричный сигнал Wnt от задних клеток гиподермы специфически индуцирует обрезку заднего нейрита, чтобы сформировать V-образный паттерн проекции нейрита PDB.Уникальная структура PDB и ее топографическое расположение относительно сигнальных сигналов позволили нам раскрыть уникальную функцию градиентно-независимой передачи сигналов Wnt при отсечении нейритов.
Передача сигналов Wnt и отсечение нейритов
Было проведено всего несколько исследований, выясняющих роль передачи сигналов Wnt в отсечении нейритов, несмотря на его критическую роль в развитии и функционировании нейронов. В C. elegans два Wnts, CWN-1 и CWN-2, действуют через CAM-1 / Ryk (рецепторную тирозинкиназу) для защиты нейритов от опосредованного mbr-1- отсечения в интернейронах AIM: отсечение дефект в AIM мутантов mbr-1 подавляется мутациями в cam-1 , в то время как избыточная экспрессия cam-1 в AIM ингибирует обрезку нейритов (Hayashi et al., 2009). Эти данные показывают, что в отличие от LIN-44 / Wnt, который инструктирует отсечение нейритов в PDB, CWN-1/2 ингибирует отсечение нейритов в AIM. Возможно, что отдельные рецепторы, экспрессируемые в нейронах AIM и PDB, лежат в основе противоположного эффекта передачи сигналов Wnt на сокращение нейритов между ними. Действительно, несколько исследований показали, что cam-1 / Ror и lin-17 / fz действуют антагонистически (Goh et al., 2012; Kidd et al., 2015). Интересная аналогия с нашим исследованием наблюдалась у Drosophila , контралатерально проецирующих серотонин-иммунореактивные дейтероцеребральные интернейроны (CSDns) (Singh et al., 2010). CSDns подвергаются обширному дендритному ремоделированию во время метаморфоза. Потеря Wingless и Wnt5 нарушает отсечение временных дендритных ветвей CSDn. Интересно, что отсечение дендритов CSDn является зависимым от активности процессом и требует их нейронов, расположенных выше по течению. Передача сигналов Wnt действует ниже нейронной активности, чтобы устранить дендриты без синаптических входов от вышележащих нейронов. Хотя еще предстоит определить, играет ли передача сигналов Wnt инструктивную или разрешающую роль в сокращении дендритов CSDn, эти наблюдения вместе с нашим настоящим исследованием показывают консервативную роль передачи сигналов Wnt в качестве сигнала сокращения.
Рецепторы Wnt и Frizzled контролируют отдельные нижестоящие сигнальные каскады (Wnt-β-catenin; Wnt-PCP; Wnt-Ca 2+ ) контекстно-зависимыми способами. Мы исследовали потенциальные нижестоящие компоненты передачи сигналов, такие как bar-1 / β-catenin , fmi-1 / flamingo, vang-1 / Van Gogh , но ни один из них не показал значительных дефектов отсечения нейритов (рис. 2E). Дальнейший генетический скрининг кандидатов и последующий генетический скрининг предоставят механистическое понимание Wnt-зависимого отсечения нейритов.
Градиент-независимая передача сигналов Wnt
Нормальное развитие Drosophila , чья эндогенная wingless заменена связанной с мембраной Wingless (nrt-wg) , подразумевает, что градиентно-независимая или контактно-зависимая передача сигналов Wnt в значительной степени достаточна для формирования паттерна нормальной ткани во время развития (Alexandre et al., 2014). Авторы также отметили важность градиентного сигнала Wingless, поскольку муха nrt-wg показала задержку развития и снижение приспособленности.Соответственно, недавние работы выявили критическую потребность в секреции и диффузии Wingless для формирования паттерна почечной трубки и компартментализации кишечника у Drosophila (Beaven and Denholm, 2018; Tian et al., 2019).
В этом исследовании мы показали, что привязанный к мембране LIN-44 достаточен для отсечения нейритов PDB, но не для терминации аксона DD6 и формирования паттерна синапсов DA9. Как клетки могут различать зависимую от градиента и независимую передачу сигналов Wnt? Одно возможное объяснение состоит в том, что каждый Wnt-зависимый процесс требует отдельного порога концентрации Wnt для активации сигнального каскада.Процессы, которые зависят от градиента, могут потребовать более низкой концентрации Wnt для выполнения процесса, чем процесс, независимый от градиента. Альтернативно, также возможно, что градиентно-независимые или контактно-зависимые процессы нуждаются в трансмембранных кофакторах, которые обеспечивают контакт-зависимую передачу сигналов Wnt. sdn-1 / syndecan был одним из таких кандидатов, поскольку было показано, что sdn-1 необходим для Wnt-зависимой ориентации веретена в раннем эмбриональном развитии (Dejima et al., 2014), а мутанты sdn-1 обнаруживают дефекты структуры PDB, аналогичные lin-44 / wnt (Saied-Santiago et al., 2017). Однако мы не наблюдали значительных дефектов обрезки в PDB мутантов sdn-1 (данные не показаны). Дальнейший генетический скрининг кандидатов и прямой генетический скрининг выявит новые факторы, которые специфически необходимы для контакт-зависимой передачи сигналов Wnt.
Привязанный к мембране LIN-44 / Wnt (Nrt-LIN-44) эффективно индуцировал отсечение задних нейритов, предполагая, что контакт с Wnt-экспрессирующими клетками, а не градиентное распределение LIN-44 запускает отсечение нейритов PDB.Модель контактно-зависимой обрезки нейритов может объяснить, почему передний нейрит, который также расположен в непосредственной близости от клеток, экспрессирующих lin-44-, может игнорировать сигнал обрезки LIN-44 / Wnt. Это также объясняет, как нейрит PDB может первоначально расти кзади от своего клеточного тела к источнику сигнала сокращения (клетки, экспрессирующие LIN-44). С другой стороны, мы не исключаем возможности того, что передний нейрит реагирует на привлекательные направляющие сигналы от передних клеток, так что он защищен от Wnt-зависимого отсечения нейритов.Мы протестировали несколько кандидатов, включая sax-7 / Neurofascin , который направляет и стабилизирует структуру дендритных ветвей сенсорного нейрона PVD (Dong et al., 2013), unc-129 / TGFβ , который представляет собой аттрактант нейритов, экспрессируемый из постсинаптические мышцы спинной стенки тела (Colavita, 1998), unc-6 / Netrin , который действует как аттрактант аксонов через рецептор unc-40 / DCC (Chan et al., 1996) и cam-1 / Ryk , который действует ниже Wnt для защиты нейритов от обрезки (Hayashi et al., 2009), но ни у одного из них не было выявлено эктопической обрезки передних нейритов. Будущие исследования будут необходимы для определения порога концентрации Wnt для индукции отсечения нейритов, а также потенциальных механизмов, которые защищают передний нейрит от отсечения.
Экспериментальные процедуры
Штаммы
Бристольский штамм N2 использовали в качестве эталона дикого типа. Все штаммы культивировали в среде для выращивания нематод (NGM), как описано ранее (Brenner, 1974), при 22 ° C. В этом исследовании использовались следующие генотипы: lin-44 (n1792), lin-44 (miz56), lin-17 (n671), egl-20 (n585), mig-1 (e1787), cam-1 (gm122). ), бар-1 (ga80), fmi-1 (tm306), vang-1 (ok1142), unc-13 (e450), dsh-1 (ok1445), mig-5 (tm2639), sdn-1 (ok449) . Праймеры для генотипирования перечислены в дополнительном материале.
Трансгены
Трансгенные линии были созданы с использованием стандартного метода микроинъекции (Fire 1986; Mello et al. 1991): mizIs9 (Pkal-1 :: zf1-GFPnovo2 :: CAAX; Pvha-6 :: zif-1; Pkal -1 :: mCherry :: rab-3), wyIs486 (Pflp-13 :: 2xGFP, Pplx-2 :: 2xmCherry с Podr-1 :: RFP), mizEx248 (Plin-44 :: lin-44; Podr-1 :: RFP), mizEx349 (Plin-44 :: egl-20; Podr-1 :: RFP), mizEx247 (Pegl-20 :: lin-44, Podr-1 :: RFP), mizEx295 (Pkal-1 :: lin-17 :: GFPnovo2; Pkal-1 :: bfp; Podr-1 :: GFP), mizEx291 (Pkal-1 :: dsh-1 :: GFPnovo2; Pkal-1 :: bfp; Podr-1 :: GFP) , mizEx317 (Plin-17 :: lin-17; Подр-1 :: RFP), mizEx374 (Prgef-1 :: lin-17; Подр-1 :: RFP), mizEx366 (Pmig-13 :: GFP :: rab -3; Pmig-13 :: lin-17 :: mCherry; Подр-1 :: GFP), mizEx271 (Plin-44 :: BFP; Подр-1 :: GFP)
Конструкция плазмиды
C.Клоны экспрессии elegans были созданы на основе производного вектора pSM pPD49.26 (A. Fire) (любезный подарок от S. McCarroll и C. I. Bargmann). dsh-1 Клон кДНК получали с помощью ОТ-ПЦР из мРНК N2 с использованием системы синтеза первой цепи Superscript III и ДНК-полимеразы Phusion High-Fidelity (Thermo Fisher Scientific). Клон кДНК lin-17 был получен из плазмиды, использованной в предыдущей работе (Mizumoto and Shen, 2013).
Плазмида Pkal-1 :: zf1-GFPnovo2-caax
Плазмида 3.Фрагмент длиной 7 т.п.н. промотора kal-1 был амплифицирован из геномной ДНК N2 с использованием фермента высокой точности Phusion (ThermoFisher Scientific, США) и клонирован в сайты Sph I и Asc I вектора pSM-GFPnovo2 (Hendi and Mizumoto , 2018). Последовательность 111 п.н. домена цинкового пальца ZF1 из pie-1 и последовательность 51 п.н. последовательности CAAX из KRas человека были вставлены в 5 ’и 3’ последовательности GFPnovo2, соответственно, с использованием метода сборки Гибсона (Armenti et al., 2014; Гибсон и др., 2009). Сигнал GFP в кишечнике снижался путем экспрессии zif-1 в кишечнике под промотором pha-6 для разрушения ZF1-GFPnovo2 :: CAAX.
Плазмида репарации нейротактин-BFP-lin-44
Плазмида, содержащая оптимизированную по кодонам кДНК нейротактина с тегом 2xHA, была получена от GeneArt (ThermoFisher Scientific, США). C. elegans Оптимизированный по кодонам BFP с тремя синтетическими интронами вставляли в 3’-конец последовательности нейротактина-2xHA для создания конструкции Neurotactin-2xHA-BFP .700 п.н. из 5′-плеча гомологии промоторной области lin-44 , нейротактин-2xHA-BFP (5′-часть до середины интрона 1), BFP (3′-часть от интрона 1), 700 п.н. 3 ‘плечо гомологии, охватывающее кодирующую область lin-44 , клонируют в сайты Sac II и Not I кассеты с двумя маркерами ( loxP + P myo-2 :: GFP : : unc-54 3’UTR + P rps-27 :: neoR :: unc-54 3’UTR + вектор loxP ) (Au et al., 2019; Гибсон и др., 2009).
lin-44 гРНК-конструкцииДве последовательности гРНК длиной 19 п.н. (gRNA3-CGATCAGTGGTGCACCTGC, gRNA4-TATTTCCGTCTTCAGCCAA) рядом с стартовым кодоном lin-CR-gen ген .sfu.ca / crispr /) и были клонированы в Rsa I сайт вектора sgRNA (F + E), pTK73 (Obinata et al., 2018).
CRISPR
Плазмида с матрицей репарации, две плазмиды sgRNA lin-44 и плазмида Cas9 (Addgene # 46168) (Friedland et al., 2013) вводили совместно молодым людям. Животные-кандидаты с редактированием генома были подвергнуты скринингу на основе устойчивости к G418 и однородной экспрессии P myo-2 :: GFP в глотке, как описано ранее (Au et al., 2019). Кассету отбора вырезали путем инъекции плазмиды рекомбиназы Cre (pDD104, Addgene # 47551). Вырезание кассеты отбора, которая была вставлена в первый интрон BFP, восстановило Neurotactin-2xHA-BFP-lin-44. Соединения между нейротактином и BFP , а также BFP и lin-44 кодирующей последовательностью были подтверждены секвенированием по Сэнгеру.
Полусинхронизация
C. elegansЯйца на различных стадиях собирали путем отбеливания беременных взрослых с помощью отбеливающего раствора (2,5% гипохлорита натрия и 0,5 н хлорида натрия) в течение 5 мин. Яйца дважды промывали буфером M9 и высевали на планшет NGM. Для наблюдения за процессом обрезки животное спасали с предметного стекла после первой визуализации на стадии L2 (примерно через 26 часов после посева яиц на чашки NGM) и помещали его в индивидуальную чашку NGM для возобновления развития на 24 часа перед повторным исследованием. -изображение на ранних стадиях L4.
Конфокальная микроскопия
Изображения флуоресцентно меченных слитых белков были получены на живых C. elegans с использованием конфокального микроскопа Zeiss LSM800 Airyscan (Carl Zeiss, Германия). Черви иммобилизовали на подушке из 2% агарозы, используя смесь 7,5 мМ левамизола (Sigma-Aldrich) и 0,225 М BDM (2,3-бутандион моноксим) (Sigma-Aldrich). Изображения анализировали с помощью программного обеспечения Zen (Carl Zeiss) или Image J (NIH, США).
Добавить комментарий